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[请教] 做一次流式所需要的细胞量是多少   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-2-7 19:55 |显示全部帖子
本帖最后由 zerollx 于 2012-2-7 19:56 编辑 . {! [$ a" S% v3 s! \

3 D; ~& y" _; X5 d% d# Z做流式一般要求细胞的浓度为10的6次方~10的7次方,太少上样过慢,太多则上样过快,均会影响实验结果,有时为了调试仪器,可能消耗的悬液较多,多以每个样至少得用500ul的液体重悬,故一个样至少需要50万细胞,12孔板你得看你养的是什么细胞了,像淋巴细胞或293T也许问题不大,若是成纤维细胞肯定是不够的了……
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沙发
发表于 2012-2-27 15:51 |显示全部帖子
回复 namulow 的帖子% e* I5 s2 Z/ Q) n, I
% @" ]7 x0 y+ {6 Y8 c. O3 w
这个问题你得看具体的厂家是如何生产的,抗体公司生产单抗是利用目的蛋白上某一段的氨基酸序列为抗原来生产抗体的,而不是全氨基酸序列。若厂家选的序列在物种间的保守型较高,以人的为例,假如他选的序列在人和兔上的同源性近100%,那就可以用,但是若他选择的序列在人和兔上的同源性很差,那就不可用,或者你就直接问厂家他们的抗体有没有再兔上做过检测,若做过且结果一直就可用,没做过那就不可用!BD的一般会生产一些哺乳动物均可用的单抗,你可以咨询下那边!还有一个方法,对于兔的脂肪干细胞的检测应该有不少的文献报道,你看他们用的是哪个公司哪个货号的单抗,你也用,但是前提是你参考的文献最好是一些高质量的杂志刊登的文章,别看那些小报的!
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藤椅
发表于 2012-2-28 14:39 |显示全部帖子
回复 namulow 的帖子
1 E3 c# l1 Z, D/ W
/ n" g+ X9 M' v' w3 L客气……
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