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[请教] 做一次流式所需要的细胞量是多少   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-2-7 17:37 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
做一次流式所需要的细胞量大概是多少?12孔板的一个孔的量够吗?
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沙发
发表于 2012-2-7 19:55 |只看该作者
本帖最后由 zerollx 于 2012-2-7 19:56 编辑
  }; k6 Z* q8 a# p5 g: Y/ j; L  f0 ^, u% x$ o% R3 H+ I
做流式一般要求细胞的浓度为10的6次方~10的7次方,太少上样过慢,太多则上样过快,均会影响实验结果,有时为了调试仪器,可能消耗的悬液较多,多以每个样至少得用500ul的液体重悬,故一个样至少需要50万细胞,12孔板你得看你养的是什么细胞了,像淋巴细胞或293T也许问题不大,若是成纤维细胞肯定是不够的了……
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藤椅
发表于 2012-2-7 21:04 |只看该作者
首先明确你流式细胞做什么?流式细胞可做很多东西,但核心就是细胞分选计数,因此细胞的处理很重要,既不能细胞粘连成块,也不能细胞成碎片。如你有500万细胞,但处理不好大部分都损失了,测的很慢。处理好的细胞一般100万足够,二楼说的最少50万是恰当的。12孔板一孔肯定不够,不建议这样做。考虑到损失,新手建议用6cm dish做。
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金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2012-2-7 21:22 |只看该作者
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那看你要测的细胞比例多少,你说的是流式分析吧,有时用来设门都可以花掉万把个细胞,一般10的5次方也行。如果是分选细胞比例少的话分出来才几个放进板里找都找不到呀。
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报纸
发表于 2012-2-8 08:48 |只看该作者
那我做一次流式能同时测出细胞的生长曲线 细胞周期以及细胞的一种表面标记物吗 还是分别做?
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小小研究员

地板
发表于 2012-2-9 01:55 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-2-9 01:55 编辑
+ I8 B! ?0 J) {" t' z5 y; D. e! T9 R. y) R
回复 lingminliang 的帖子
+ ?  T: K8 P/ y7 @  V7 y4 ^, J; I6 ]0 _5 {3 J  s
你想要询问哪个会员 就点击他的回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 这样他上线就会看到提醒
$ T# y8 A; `7 ]- n+ i% F+ }% m9 A: ~0 Q6 ~. w9 N5 U% r; n
像你这样询问 他们很难看到的
" ^" D( Y: w7 v% u& K$ h) r7 ]; p4 E4 e: O. G
像我回复你的帖子这样

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发表于 2012-2-9 14:08 |只看该作者
回复 lingminliang 的帖子3 O$ T, g9 ~4 q& [1 J" K

( a' Q5 w% V( G! X5 w7 V* F( |% x1 A细胞的生长曲线是?我做过表面标记和周期一起做的
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发表于 2012-2-12 19:28 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子
- F* F% m8 O. h9 \
# @$ M0 R( I8 w7 Y哦 明白了 谢谢赐教

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发表于 2012-2-17 20:24 |只看该作者
楼上的高手已解答很详细,记得细胞浓度和你的细胞类别来确定用量
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发表于 2012-2-26 12:35 |只看该作者
回复 zerollx 的帖子: M, F* V# x- d" N$ C; A

# N* Y. }  U. @# R; T3 T, F: |8 N$ ^5 }老师,请教个问题,我没做过流式分析,现在准备把兔子的脂肪干细胞做个流式分析,现在准备买抗体,但是兔子的单抗很难买到啊,做流式分析的话,抗体都有严格的种属区分么,用鼠的单抗可以么?我是小白。。。。
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