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[请教] 做一次流式所需要的细胞量是多少   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-2-7 17:37 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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做一次流式所需要的细胞量大概是多少?12孔板的一个孔的量够吗?
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沙发
发表于 2012-2-7 19:55 |只看该作者
本帖最后由 zerollx 于 2012-2-7 19:56 编辑 5 O5 c0 @, a" ^/ c1 ~6 Y0 Q6 i1 c  _

2 |0 L  Q% t' r% L做流式一般要求细胞的浓度为10的6次方~10的7次方,太少上样过慢,太多则上样过快,均会影响实验结果,有时为了调试仪器,可能消耗的悬液较多,多以每个样至少得用500ul的液体重悬,故一个样至少需要50万细胞,12孔板你得看你养的是什么细胞了,像淋巴细胞或293T也许问题不大,若是成纤维细胞肯定是不够的了……
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藤椅
发表于 2012-2-7 21:04 |只看该作者
首先明确你流式细胞做什么?流式细胞可做很多东西,但核心就是细胞分选计数,因此细胞的处理很重要,既不能细胞粘连成块,也不能细胞成碎片。如你有500万细胞,但处理不好大部分都损失了,测的很慢。处理好的细胞一般100万足够,二楼说的最少50万是恰当的。12孔板一孔肯定不够,不建议这样做。考虑到损失,新手建议用6cm dish做。
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金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2012-2-7 21:22 |只看该作者
那看你要测的细胞比例多少,你说的是流式分析吧,有时用来设门都可以花掉万把个细胞,一般10的5次方也行。如果是分选细胞比例少的话分出来才几个放进板里找都找不到呀。
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报纸
发表于 2012-2-8 08:48 |只看该作者
那我做一次流式能同时测出细胞的生长曲线 细胞周期以及细胞的一种表面标记物吗 还是分别做?
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地板
发表于 2012-2-9 01:55 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-2-9 01:55 编辑 : Q& A9 @. o  y
2 R  ]7 V/ n) P! K5 V* F) O1 d
回复 lingminliang 的帖子
. c2 h. r0 ^# R. t5 k) n, g
: O1 j2 U; z; j* x7 ?; l9 c你想要询问哪个会员 就点击他的回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 这样他上线就会看到提醒
2 L- c7 I. i$ Z+ u9 s
2 p. K; W* w* o; j: p0 ^像你这样询问 他们很难看到的
, @; |# Q! f: ?7 p! @/ {+ g9 O
9 N5 }) B, f" d& i* A; u像我回复你的帖子这样

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7楼
发表于 2012-2-9 14:08 |只看该作者
回复 lingminliang 的帖子
! d3 s4 h3 D+ f$ ?3 u7 g* z/ e; k4 @5 {& N6 U; C/ `
细胞的生长曲线是?我做过表面标记和周期一起做的
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8楼
发表于 2012-2-12 19:28 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子; H2 y$ F, \# F4 {" y7 l, t2 m
& r: g+ E* z' B2 U
哦 明白了 谢谢赐教

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9楼
发表于 2012-2-17 20:24 |只看该作者
楼上的高手已解答很详细,记得细胞浓度和你的细胞类别来确定用量
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10楼
发表于 2012-2-26 12:35 |只看该作者
回复 zerollx 的帖子
$ {6 C4 Q2 L, M# o) n3 q; X. V6 x6 _+ g3 n1 g/ n; E
老师,请教个问题,我没做过流式分析,现在准备把兔子的脂肪干细胞做个流式分析,现在准备买抗体,但是兔子的单抗很难买到啊,做流式分析的话,抗体都有严格的种属区分么,用鼠的单抗可以么?我是小白。。。。
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