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大家用低糖DMEM的干细胞原代要长好久   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-2-8 10:22 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
如题,大家用低糖DMEM的干细胞(原代)要长好久才能达到80%融合?
7 g- X" l  {2 c; d# T! B4 p' H是不是速度远远慢于高糖?
( J0 g* p9 ?) f/ {- j听说高糖会导致部分干细胞老化快,是这样吗?
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沙发
发表于 2012-2-8 10:36 |只看该作者
10天左右  去年我也用高糖养过一小段时间感觉是容易老化  就又换回低糖了
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藤椅
发表于 2012-2-9 19:46 |只看该作者
不同的干细胞适合的培养基不同吧,你们养的是间充质干细胞吗?
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板凳
发表于 2012-2-9 22:59 |只看该作者
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最近用高糖和低糖的同时养,生长速度差不多,10天左右能传代,不过我用的全骨髓培养法,杂细胞较多
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报纸
发表于 2012-2-10 17:54 |只看该作者
我用的间充质干细胞,全骨髓法,培养基是L-DMEM,FBS,双抗。
; K( H0 V( R8 F4 q; p+ f" |& Y* B24H洗了一下换了液,今天48H去看,几乎看不到像干细胞的。0 t0 S- j6 ]$ e( q! e
晃了再看,小圆细胞都不贴壁,是不是晃的次数太多了?7 U) L* i# M8 s2 K; l
今天不敢换了,打算明天去看看长贴壁没。; H- A5 S! I6 n4 ~1 j. A

8 R2 D8 Y9 V0 B* \: l
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地板
发表于 2012-2-10 21:12 |只看该作者
回复 amney1 的帖子
( O# u1 `) D4 x, n8 @* m- R; V) A4 _0 U- p9 c+ P$ M
一个养大鼠间质干细胞的前辈给我说的方法:48小时换液,不用PBS洗,传代时才用PBS洗,按他的方法我养的感觉还可以,不过杂细胞有点多,大鼠要60-80g的,不知你养的是什么间质干细胞
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发表于 2012-2-13 15:34 |只看该作者
我用的800g,3min,是不是转太猛了?大家都怎么离心的呢?

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发表于 2012-2-13 15:34 |只看该作者
我用的800g,3min,是不是转太猛了?大家都怎么离心的呢?

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发表于 2012-2-14 13:05 |只看该作者
回复 amney1 的帖子8 ]7 d  C8 g% M% o4 j+ W
" m$ T2 Q; A6 D3 E5 G$ F4 r0 x
800这么大的离心力没试过。降到700左右试一试。
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发表于 2012-2-14 13:06 |只看该作者
一般一周左右即可。
# Y: B, k6 }* S' J5 j2 q高糖是容易导致细胞分化。
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