大家用低糖DMEM的干细胞原代要长好久

amney1

如题，大家用低糖DMEM的干细胞（原代）要长好久才能达到80%融合？  X, o/ T# ~3 A# v
是不是速度远远慢于高糖？
, l2 w4 @  Z3 n# J听说高糖会导致部分干细胞老化快，是这样吗？

李1二

10天左右  去年我也用高糖养过一小段时间感觉是容易老化  就又换回低糖了

shangchunhua

不同的干细胞适合的培养基不同吧，你们养的是间充质干细胞吗？

bnm789

最近用高糖和低糖的同时养，生长速度差不多，10天左右能传代，不过我用的全骨髓培养法，杂细胞较多

amney1

我用的间充质干细胞，全骨髓法，培养基是L-DMEM,FBS,双抗。
5 C6 I/ b, {7 \  ]. f% _$ A) y* T24H洗了一下换了液，今天48H去看，几乎看不到像干细胞的。0 H$ f! I! M) V
晃了再看，小圆细胞都不贴壁，是不是晃的次数太多了？( O( j& _- J# a1 j; Y
今天不敢换了，打算明天去看看长贴壁没。- {1 N8 D" [7 Y" E; r2 @( x
- S0 j3 \) ~# n

bnm789

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% M% w7 E7 f) z
2 y* c0 ?& G% H一个养大鼠间质干细胞的前辈给我说的方法：48小时换液，不用PBS洗，传代时才用PBS洗，按他的方法我养的感觉还可以，不过杂细胞有点多，大鼠要60-80g的，不知你养的是什么间质干细胞

amney1

我用的800g，3min,是不是转太猛了？大家都怎么离心的呢？

amney1

我用的800g，3min,是不是转太猛了？大家都怎么离心的呢？

shashou_com

回复 amney1 的帖子  v" S9 K! j6 [$ l, U$ P$ Y

: z, i- D9 o9 C1 Y( K3 P800这么大的离心力没试过。降到700左右试一试。

shashou_com

一般一周左右即可。
: B, z) S) v/ `$ s% O" L高糖是容易导致细胞分化。