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1、培养细胞消化收集细胞,PBS洗涤至少一次对于敏感的细胞最好含有1%的BSA;
' q5 e6 h, F7 |0 e, P; ]/ `# E2、按106有效细胞与1ug 抗体进行染色,或按照抗体说明书推荐的量进行;
! y" m* |, R* f% J* X4 b3、染色通常室温避光15-30分钟,染色体系体积通常在100-500ul(流式是没有标准染色体系的,染色前洗一次后去上清,剩余部分液体重悬所有细胞就可以。)! Y; L5 p3 k9 k. s2 }, j$ D0 d
4、染色完成后洗涤至少两次,300g离心5min,弃去上清;
1 W" b1 E( q; F5、通常加入PBS稀释样本至500-1000ul备检(加入的标准量是终体积500ul,如果不及时上机,可以重悬于500ul的1%多聚甲醛中后上机)。 |
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