msc贴壁问题

sj842563

我养了好久的msc，刚开始时，消化后细胞状态和数量都很好，但是间断了一段时间后，现在怎么养都养不好，有人遇见过这样的事情吗？
4 N0 E5 }, D" A8 I' R+ \2 s我使用的消化液是0.5%二型胶原酶，培养基使用的是10%Fbs DMEM

wind789

回复 sj842563 的帖子) D2 C8 V' t5 n9 {5 }  |* a. n0 E( u

& O# u- Y1 \9 a% `( h2 E7 L" q间隔一段时间是什么意思啊？传代后？

sdwzg119

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/ P1 m: O+ g, g是隔了一段时间怎么也养不好了？是吧？是原代养不出来了吗？我遇到过这种事情，原因是更换了血清！！有些批次的血清会不好，但是也可能是其他原因，有时候莫名其妙的一阵不好，一阵以后又好了！

shashou_com

1.消化的很好，有时候也会消化过度，当时细胞量比较足，后面细胞死亡。$ m; E; V: G2 M* q& {+ D. o
2.支原体污染影响细胞状态以及分裂。' K/ c0 @# \( t4 P" P' B/ Y3 Y
等等。。。。

sj842563

回复 wind789 的帖子9 n" n/ X8 @7 q
1 W3 J# G. o1 M; a  C( w
是有一段时间没有做，等再做的时候就怎么做都做不好了

sj842563

shashou_com 发表于 2012-2-14 12:56 / a4 z3 e( Q2 r$ b$ s
1.消化的很好，有时候也会消化过度，当时细胞量比较足，后面细胞死亡。
2 f7 B" _  B/ K; b6 Z* M) k2.支原体污染影响细胞状态以及分裂 ...

) }" n9 r- A7 A) n" i) E经常看见有人说支原体感染，感染后什么状态，怎样检测，最方便的方法是什么？

trl137

1 你说的间隔一段时间是什么意思？如果是冻存后再解冻后发现了这样的问题，那就说明你冻存时有问题。  H5 w  S- s7 U6 k$ b
2 一般细胞培养一段时间后，都会出现不好好增殖的情况，这时要适当提高血清的浓度& {' \" b) _" N7 J$ m* Z7 |
3 要检测细胞培养箱的CO2和温度是否准确