msc贴壁问题

sj842563

我养了好久的msc，刚开始时，消化后细胞状态和数量都很好，但是间断了一段时间后，现在怎么养都养不好，有人遇见过这样的事情吗？
% f4 ], G& h- U8 I" U  l我使用的消化液是0.5%二型胶原酶，培养基使用的是10%Fbs DMEM

wind789

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5 _/ d5 P: p" T5 d( o1 H9 Z* T! O- K+ M1 J
间隔一段时间是什么意思啊？传代后？

sdwzg119

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' f; M* |5 E2 f4 }# T  Q$ }! a0 U$ s2 w" m8 Q( y
是隔了一段时间怎么也养不好了？是吧？是原代养不出来了吗？我遇到过这种事情，原因是更换了血清！！有些批次的血清会不好，但是也可能是其他原因，有时候莫名其妙的一阵不好，一阵以后又好了！

shashou_com

1.消化的很好，有时候也会消化过度，当时细胞量比较足，后面细胞死亡。2 ?2 g. y  L# |1 a( d  Z% R+ Z
2.支原体污染影响细胞状态以及分裂。3 F" U- M8 N. n) G
等等。。。。

sj842563

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7 {: T- `; m( w4 x4 t" I9 n& z1 g7 j
是有一段时间没有做，等再做的时候就怎么做都做不好了

sj842563

shashou_com 发表于 2012-2-14 12:56
0 p* c3 X% _: R2 C9 R2 F' o1.消化的很好，有时候也会消化过度，当时细胞量比较足，后面细胞死亡。% p+ m' j4 ]! w5 A  ?/ u8 a
2.支原体污染影响细胞状态以及分裂 ...

" R6 S1 W$ H. }+ N9 s' ^7 M: ~. i
经常看见有人说支原体感染，感染后什么状态，怎样检测，最方便的方法是什么？

trl137

1 你说的间隔一段时间是什么意思？如果是冻存后再解冻后发现了这样的问题，那就说明你冻存时有问题。2 e% ^! C' S/ c
2 一般细胞培养一段时间后，都会出现不好好增殖的情况，这时要适当提高血清的浓度: p1 a$ v! r7 L% n
3 要检测细胞培养箱的CO2和温度是否准确