求教睾丸微注射实验

huozhicb

小弟想做一下睾丸微注射，想向大家讨教一下：7 b* Z0 r. V4 g! q+ s
我的目的是利用睾丸的微环境诱导干细胞向精子分化，要将细胞注入睾丸中。想请教一下专家以下问题：
/ ]) x+ r* A9 v. B8 t; @1、注射针的参数具体是多少？
. e' G# @/ _! d2、注射位点是哪？我看了一下网上的资料，有注射到曲精细管的，也有注射到输出小管的，具体哪些位置比较合适呢？# C& O1 @) f! G
3、我之前试了一下，感觉难度最大的就是将注射针插到曲精细管里，各位有什么诀窍吗？
& o5 F) U9 F, d8 V: H: f谢谢！: m/ ]& h! i+ n5 O8 q( U( _* Q
有相关资料的话，请不吝上传！

zijunqin

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$ E: b- F" Q9 L# S* o6 H
/ W6 U* `; g( r: z1 opup 是小狗吧

w343989328

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呃，我说的pup是指10d的小鼠。。应该没错吧。。。谢谢你，我先去尝试过再来讨教

zijunqin

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4 J' H0 p6 X1 d  ]0 A
% [1 l$ F, {9 d- w. J  a/ s2 f+ y10d 使用avetin 0.4ml/25g 麻醉可以，5D建议冷冻麻醉；解剖横切和纵口我都试过，都可以，建议纵口；缝合后睾丸归位，pup?很高端啊！ 我没做过；孕鼠注射白消安需要摸浓度，过高造成流产，我已试过30mg/kg,流产，建议降低浓度尝试

w343989328

回复 zijunqin 的帖子4 C$ |$ q/ b% l& ^$ T
8 U" |( A# W# v# V: `* P
我想问下，10d小鼠注射的话，是用冷冻麻醉吗？解剖时是剪个纵口，缝合前要让睾丸归位吗？我们移植的不是SSC，我担心移植进去的细胞竞争不过内源性SSC，不知道选择pup作为受体合不合适，有老师说可以在母鼠怀孕时注射白消安，但我没找到文章，不知道可不可行、

zijunqin

回复 w343989328 的帖子! s* I0 U; _/ o9 U- A# Q6 J% x0 N4 i5 H

" L4 j+ D7 D2 q* g0 l0 H不知道为什么不能加你好友  你就留言吧  就是有时差可能不能及时回复你

zijunqin

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进针是由睾丸网，WT和nude mice 都打过 多打就熟练了

w343989328

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" C$ ^+ `+ x# l+ m& y: H- p
% g# b1 Q7 D$ u  N" |  t. n2 q+ K4 S请问你是从那个部位注射进去的？曲细精管、睾丸网还是输出小管？c-kit mutant的mice还是WT的？

zijunqin

回复 w343989328 的帖子  Q# m' K: U7 D& b) h2 Z! e$ L& K

; E$ a5 Y, ~& j8 I* V0 l10天的比较熟练  5天的成功率低些  普通体视镜就可以了

w343989328

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7 B: ~9 F, f$ @你能注射进10d小鼠的睾丸吗？需要显微操作设备不？