求教睾丸微注射实验

huozhicb

小弟想做一下睾丸微注射，想向大家讨教一下：3 n: R8 B8 u3 r1 n5 u* }" q
我的目的是利用睾丸的微环境诱导干细胞向精子分化，要将细胞注入睾丸中。想请教一下专家以下问题：
+ T- A7 X0 [% A& `$ p1、注射针的参数具体是多少？
, i) s/ q- @( m. u2、注射位点是哪？我看了一下网上的资料，有注射到曲精细管的，也有注射到输出小管的，具体哪些位置比较合适呢？/ ?5 r# x* Z* `& O1 K' l
3、我之前试了一下，感觉难度最大的就是将注射针插到曲精细管里，各位有什么诀窍吗？  U* e8 z5 r9 B1 _; |( d0 S
谢谢！0 g1 r1 n* e/ r  N1 ]2 ]
有相关资料的话，请不吝上传！

zijunqin

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: N0 ~; m. }7 l3 k: I8 u7 w0 B
pup 是小狗吧

w343989328

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  w: j' f2 V5 g$ z
/ N/ N. T" |1 r- f8 n呃，我说的pup是指10d的小鼠。。应该没错吧。。。谢谢你，我先去尝试过再来讨教

zijunqin

回复 w343989328 的帖子4 t. h: Z4 Z5 X( y( g$ V, F
3 ?7 `; J4 i+ z0 T3 Y: }( c
10d 使用avetin 0.4ml/25g 麻醉可以，5D建议冷冻麻醉；解剖横切和纵口我都试过，都可以，建议纵口；缝合后睾丸归位，pup?很高端啊！ 我没做过；孕鼠注射白消安需要摸浓度，过高造成流产，我已试过30mg/kg,流产，建议降低浓度尝试

w343989328

回复 zijunqin 的帖子' ~4 s* [/ \0 e6 u, v  y
6 U* L3 m& m) s0 n0 r# D
我想问下，10d小鼠注射的话，是用冷冻麻醉吗？解剖时是剪个纵口，缝合前要让睾丸归位吗？我们移植的不是SSC，我担心移植进去的细胞竞争不过内源性SSC，不知道选择pup作为受体合不合适，有老师说可以在母鼠怀孕时注射白消安，但我没找到文章，不知道可不可行、

zijunqin

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不知道为什么不能加你好友  你就留言吧  就是有时差可能不能及时回复你

zijunqin

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进针是由睾丸网，WT和nude mice 都打过 多打就熟练了

w343989328

回复 zijunqin 的帖子( |" |5 ~1 t* z; y9 D2 {# |
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请问你是从那个部位注射进去的？曲细精管、睾丸网还是输出小管？c-kit mutant的mice还是WT的？

zijunqin

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3 ^" Y1 m! i0 Q8 e
) u: z7 z# W/ b7 l6 y10天的比较熟练  5天的成功率低些  普通体视镜就可以了

w343989328

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5 r1 Y- ~" [6 ]* O) f# j9 ]" J你能注射进10d小鼠的睾丸吗？需要显微操作设备不？