请教 4个多能性因子病毒液感染293T？

乳杆菌

请问 有人做过 4个多能性因子的病毒液感染293T 细胞吗？
! d% O8 c8 U6 d$ J, F: B  L! Y! y. b4 T9 w+ e
我们新构建的质粒 想测下是否转入细胞中 病毒感染2天后 得到结果Oct4跟Sox2 的表达量反而比293T本身表达量低了。。。
( {7 P& N7 I$ d0 U1 R3 P, [( t. ~' n$ ?! p' A# e
这结果还能说明什么吗？

lemma710

转293T是为了测病毒的滴度的吧，滴度好了转染细胞的效率才高呀4 h4 _# A& Q9 h5 `' F( j0 @% I
而且，如果你的目标细胞很难转的话，表达率也会相对降低的吧~

2006sw0657

如果想测下是否转入细胞中 最好用GFP标记一下

igdb

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- r& ?2 Z3 o$ W2 a5 B) R  L' F) l7 L$ Y0 f: t4 A
我还是没明白。。

乳杆菌

回复 huangcong1988 的帖子) R1 ?' U- y$ e$ b8 e+ J! v
& G3 i" [* m( d
想验证多能基因能否插入细胞基因组中  只是用293做个验证
8 o5 E' e4 I/ Q9 U请问 这样有不妥吗？' k! `) w3 F; Q$ V! X
4 s7 \0 P5 e# U! D
可能我表达的不太清楚= =

乳杆菌

回复 igdb 的帖子; y! {0 h  y0 J1 Q

7 S8 K* g5 d+ i8 S: M' B' [/ W是我们将多能因子构建到了另一种载体上 不知道用这个质粒能否插入到细胞基因组中  所以就直接转了293T  不是在做iPS  只是想验证4 K: @4 K" i3 `% _5 j2 U
. @# |0 f7 _8 t" f
好像293也表达四因子的 所以用293空白对照 最后看四个因子的表达量是不是增加/ f  x  Q. D5 N' `  D) h! Z
但是 我们做出来的结果相反。。。不知表达明白没有( {* F9 @; t& Y

" D0 B& j6 q) Z. ^7 y  M" I

huangcong1988

什么意思？我完全糊涂了" ?5 t8 ~4 o- h- E
你拿病毒液感染293T细胞干嘛呢？293T细胞是用来包装病毒的吧？( i, k- }  C# T/ i1 I0 M
你是说新构建的质粒，质粒转染293T包装病毒吧？

igdb

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( X4 r2 |" r& }$ ?& d
$ ?! N" C' G& g$ }* x! P# I( S做IPS很少有人用细胞系做吧。。不过也确实见过文献里有用细胞系做的，忘记是不是293T了。。
& S# b1 P) _" v) G2 L4 m0 ]你的实验结果。。。谨慎怀疑设计或中间步骤出错
  M* G/ l; E. E& `9 n3 S1 g    新构建的质粒。。病毒感染。。讲清楚点吧