请教 4个多能性因子病毒液感染293T？

乳杆菌

请问 有人做过 4个多能性因子的病毒液感染293T 细胞吗？
; ~: `7 y! W, G! B( s: R
+ V+ q& X. r7 ?8 ~2 j( b我们新构建的质粒 想测下是否转入细胞中 病毒感染2天后 得到结果Oct4跟Sox2 的表达量反而比293T本身表达量低了。。。, h# }, e% _, V* |% P% s9 t
' b! a7 N9 ?1 K2 W; c" j& L1 u3 x
这结果还能说明什么吗？

igdb

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$ y/ M/ t( j( s- A1 F
* ^6 v# K, p9 I9 W0 |. i7 b做IPS很少有人用细胞系做吧。。不过也确实见过文献里有用细胞系做的，忘记是不是293T了。。4 @9 V' V1 o" T! S% t9 n( ^: {
你的实验结果。。。谨慎怀疑设计或中间步骤出错
0 U& R6 ]8 D; P1 h9 P    新构建的质粒。。病毒感染。。讲清楚点吧

huangcong1988

什么意思？我完全糊涂了+ ^0 @+ \; r$ ?; f9 f& C
你拿病毒液感染293T细胞干嘛呢？293T细胞是用来包装病毒的吧？: P4 U6 g# L/ m1 N5 Q! S
你是说新构建的质粒，质粒转染293T包装病毒吧？

乳杆菌

回复 igdb 的帖子; Y7 c  u& f1 T$ K0 \

% L4 C* u' x, b* L: ^4 Q4 q: \是我们将多能因子构建到了另一种载体上 不知道用这个质粒能否插入到细胞基因组中  所以就直接转了293T  不是在做iPS  只是想验证2 a. [3 v7 l& [, b4 }) ^

4 F% i1 T8 V! n2 U; H/ |; Q好像293也表达四因子的 所以用293空白对照 最后看四个因子的表达量是不是增加
, Z- B- n4 u9 ^* `; n0 E但是 我们做出来的结果相反。。。不知表达明白没有2 c: ~& }' l$ Z

& S) c/ [, u. z# E/ M: {

乳杆菌

回复 huangcong1988 的帖子7 t1 J  r4 d- @9 h6 d6 o+ v

0 b- p# H! K; h8 E" U4 a想验证多能基因能否插入细胞基因组中  只是用293做个验证$ X6 j1 j: M8 {% {( x
请问 这样有不妥吗？
) f& I. U. Z8 q1 G& k0 b
8 U: _% P8 C7 ?" o& Y8 l9 p, W7 ?可能我表达的不太清楚= =

igdb

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* @5 W* @0 n) r& {& Z- W6 ?- ^/ w  N4 e
我还是没明白。。

2006sw0657

如果想测下是否转入细胞中 最好用GFP标记一下

lemma710

转293T是为了测病毒的滴度的吧，滴度好了转染细胞的效率才高呀# T0 i$ u) m( o& D# I* L
而且，如果你的目标细胞很难转的话，表达率也会相对降低的吧~