脐带间充质细胞贴壁法出芽率怎么这么低？？

shizhu198511

脐带间充质细胞贴壁法为什么一个皿里有的组织块可以长出来MSC，有的长不出来，有时大皿能长出来，有时小皿能长出来，究竟什么原因，同样的环境下，我的10块组织可能有1块长出来，前辈做的出芽率多高呀？究竟什么原因？？、

雁南飞

相当地低，检讨一下培养体系。

shizhu198511

雁南飞 发表于 2012-2-21 11:50 ; w$ h! q2 U& P, |! q' i3 `
相当地低，检讨一下培养体系。

' y% e7 C* V4 ]- y: ?& n我的是α-MEM+GIBCo胎牛血清10%的，难道血清浓度太低了，没加什么因子

sanfa

你几天看的  多等几天 别着急 有时候爬的比较慢

liluli0715

我们用的培养体系跟你一样，大多数组织都能迁出细胞，你的之所以迁出少，跟你组织块的大小有关，一般来说组织块越小越容易迁出细胞，此外与组织块贴壁牢程度也有关

雁南飞

回复 shizhu198511 的帖子
7 ~; i- z& v$ P4 [, C7 Y0 d* C
加点EGF和FGF试试

leungyk

我也不是每塊組織都有細胞爬出來，大約只有1/3成功
9 G% P4 \7 h6 H7 k. n$ @( W4 q( [, r6 e1 t$ A7 {
另外，我看過一份研究是沒有把組織切成小塊，只打開臍帶拿走血管就成段的去培養，最近試試用大約1cm平方的組織去培養，成功率很高呀！8 a9 q9 E+ f' M" @+ i% J
我用的是DMEM/F12+10%FBS

shizhu198511

leungyk 发表于 2012-2-24 11:25
' B' h! r% ?3 _- J) t6 \我也不是每塊組織都有細胞爬出來，大約只有1/3成功
( w- F2 y1 G: \+ g5 y' y5 W- r. G7 f
' B1 s! S1 ]4 }- t1 r另外，我看過一份研究是沒有把組織切成小塊，只打開臍 ...

+ o! B- I4 j; ?
请问你是怎么把组织块切成1cm2的，谢谢！

雁南飞

去除血管后剪成碎块似乎更好一点啊，米粒大小就可以了。

brian111

我们之前用的那种弯头的小剪刀，把华通氏胶剪成尽量小的块，越小越好，但是时间不要太长，也不能让胶干了。可我觉得最重要的还是培养基，培养基好的话，有的时候就算减得比较大，也能爬出来，基本上没有爬不出来的！可是我们用的是商品培养基，这点上帮不了你