qRT-PCR结果分析

frankieisme

q-PCR的结果肯定比普通PCR的结果靠谱,重现性也要好.你的问题可能是操作or机器的问题.溶解曲线好不好只能说明你的产物的特异性,具体量的差异还得看Ct值.你确定做的是绝对定量?一般实验室的qPCR都做不到决定定量,首先是需要Taqman探针,再者需要构建质粒,根据质粒的copy数绝对定量.

frankieisme

回复 huangcong1988 的帖子: `# b5 f# Q4 r2 B3 `+ C# ]

/ B' c+ e  z9 j- v  m% {3 B7 X$ u每次不一样是可以理解的,只要deltaCt值是恒定的旧可以,因为你每次做的时候阈值定义不一定是一样的,最终mRNA的相对量也是根据deltaCt值来确定的.

frankieisme

回复 zdgrp 的帖子! C$ M( Y9 f5 }
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这个变化是可以理解的,但只要deltaCt值相对稳定就可以.RealtimePCR的重复性应该是很高的.