关于干细胞成软骨的问题

wuyannini

我看到有的文献报道关于成软骨培养基的配制只这样的：
$ J" s& f; h7 r成软骨诱导：/ K& i: G1 t5 a/ V9 d' q
DMEM-HG 10FBS
  F7 Q1 m6 \. `& `/ d& C: \0 V脯氨酸（proline）                      4mM5 A) F' u: G: q
抗坏血酸维生素C （ascorbic acid）       50ug/ml      
* l6 t9 t: {2 l/ M* k7 mITS-Premix                                                 1% 0 b& ^9 ^  J7 c! a
丙酮酸钠（sodium pyruvate）           1 mM/ L: V4 l$ d* y7 f! ^
地塞米松（dexamethasone）            0.1um
3 Y- h4 y4 b+ B# s2 LTGFβ3                                                        10 ng/mL9 i. }( M, ^/ l* f0 t* b  \
请问有经验的大侠，脯氨酸是L还是D，还是都可以？ITS-Premix是什么？这些试剂哪个厂家的比较好？谢谢啦# \* L7 X2 q7 \
另外，染色液的配制及染色方法也麻烦赐教。  . h2 ?! w+ L4 d
不要随便粘贴过来啊，要已经成功的经验啊。非常感谢啦！

wuyannini

非常感谢！

wangzhiqi86

看来你是第一次做软骨诱导了，ITS是无血清添加剂，分别是胰岛素（insulin）、转铁蛋白（transferrin）和亚硒酸（selenious acid），+premix里面还有BSA和亚油酸，你可以看看BD的，proline是L-型。8 e! k: \9 f8 d
再有，软骨诱导时不要加血清的，不知道你是从哪里看到的文献。
% y* L+ C8 S- }+ w3 K软骨诱导有很多种，一般是番红O、甲苯胺蓝和阿利新蓝染色，这个鉴定ECM的aggrecan，具体步骤你可以上网查。还可以用免疫荧光和免疫组化来染色鉴定II型胶原。

wangzhiqi86

看来你是第一次做软骨诱导了，ITS是无血清添加剂，分别是胰岛素（insulin）、转铁蛋白（transferrin）和亚硒酸（selenious acid），+premix里面还有BSA和亚油酸，你可以看看BD的，proline是L-型。& V* H0 v" X) v; P) z
再有，软骨诱导时不要加血清的，不知道你是从哪里看到的文献。& @6 b/ ~! g+ R6 K
软骨诱导有很多种，一般是番红O、甲苯胺蓝和阿利新蓝染色，这个鉴定ECM的aggrecan，具体步骤你可以上网查。还可以用免疫荧光和免疫组化来染色鉴定II型胶原。