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[请教] 关于干细胞成软骨的问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-3-3 09:56 |只看该作者 |正序浏览 |打印
我看到有的文献报道关于成软骨培养基的配制只这样的:
$ J" s& f; h7 r成软骨诱导:/ K& i: G1 t5 a/ V9 d' q
DMEM-HG 10FBS
  F7 Q1 m6 \. `& `/ d& C: \0 V脯氨酸(proline)                      4mM5 A) F' u: G: q
抗坏血酸维生素C (ascorbic acid)       50ug/ml      
* l6 t9 t: {2 l/ M* k7 mITS-Premix                                                 1% 0 b& ^9 ^  J7 c! a
丙酮酸钠(sodium pyruvate)           1 mM/ L: V4 l$ d* y7 f! ^
地塞米松(dexamethasone)            0.1um
3 Y- h4 y4 b+ B# s2 LTGFβ3                                                        10 ng/mL9 i. }( M, ^/ l* f0 t* b  \
请问有经验的大侠,脯氨酸是L还是D,还是都可以?ITS-Premix是什么?这些试剂哪个厂家的比较好?谢谢啦# \* L7 X2 q7 \
另外,染色液的配制及染色方法也麻烦赐教。  . h2 ?! w+ L4 d
不要随便粘贴过来啊,要已经成功的经验啊。非常感谢啦!
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板凳
发表于 2012-3-4 17:55 |只看该作者
非常感谢!

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藤椅
发表于 2012-3-3 16:05 |只看该作者
看来你是第一次做软骨诱导了,ITS是无血清添加剂,分别是胰岛素(insulin)、转铁蛋白(transferrin)和亚硒酸(selenious acid),+premix里面还有BSA和亚油酸,你可以看看BD的,proline是L-型。8 e! k: \9 f8 d
再有,软骨诱导时不要加血清的,不知道你是从哪里看到的文献。
% y* L+ C8 S- }+ w3 K软骨诱导有很多种,一般是番红O、甲苯胺蓝和阿利新蓝染色,这个鉴定ECM的aggrecan,具体步骤你可以上网查。还可以用免疫荧光和免疫组化来染色鉴定II型胶原。

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沙发
发表于 2012-3-3 16:05 |只看该作者
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看来你是第一次做软骨诱导了,ITS是无血清添加剂,分别是胰岛素(insulin)、转铁蛋白(transferrin)和亚硒酸(selenious acid),+premix里面还有BSA和亚油酸,你可以看看BD的,proline是L-型。& V* H0 v" X) v; P) z
再有,软骨诱导时不要加血清的,不知道你是从哪里看到的文献。& @6 b/ ~! g+ R6 K
软骨诱导有很多种,一般是番红O、甲苯胺蓝和阿利新蓝染色,这个鉴定ECM的aggrecan,具体步骤你可以上网查。还可以用免疫荧光和免疫组化来染色鉴定II型胶原。
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