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第二张图,你那胚胎也太大了,呵呵,感觉再过一两天就快出生了。取13.5天的胚胎做吧(胚胎很小的!如果肉眼看起来困难,可以放体视镜下操作),把头、尾、四肢和内脏(红色的一团)去掉,消化成单细胞接种,平均1胚胎的细胞接种到2个10cm皿,细胞长的很快。13.5天的胚胎,杂细胞最少! a( o$ v; U- G. I: ?+ e1 ~6 l s
, k4 ^+ Q# B4 w* x, |$ V另外,消化的时候,别消化的太厉害把细胞消化死了,呵呵。其实,MEF很好做的。
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戴手套吧,别污染了,就白忙活了,记得加2X双抗。
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. T$ s! l3 T; M4 v6 v* ^0 `$ F. W! gMMC处理后大约三四天后会慢慢出现死细胞,一周左右大量死亡,但有些细胞能坚持到2周及以后。 |
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