胰蛋白酶EDTA对我的EPC居然不起作用？！

henryjia

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胰蛋白酶EDTA对我的EPC居然不起作用？！这是怎么回事？消化了7.8分钟细胞都不脱壁。细胞是在10%血清培养基培养的，不纯。

echo666

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我的EPC就很好消化，因为本身EPC的贴壁就不是特别牢啊，后期传代中我都没用FN铺板，难道我一直误会EPC了？求各位大侠指点

almasun97184

再看了一下你的图，这种细胞不是EPC，脐血单个核贴壁以后会出现，基本不增殖，也很难消化。EPC的克隆不是长成这样的。
4 b7 X! U, H- \/ y) e这种细胞也不是MSC，MSC克隆出现后增殖神速，也很好消化。

almasun97184

你那个真的是内皮细胞么？内皮细胞是很好消化的细胞。我养的脐血EPC都是必须把胰酶EDTA稀释5倍以上才行的，不然消化后细胞状态会渐渐不好。7 m- S) E- T* T7 f8 `
通常先PBS洗一次，用预热了的0.01%的胰酶EDTA，在培养箱里放1分钟，拿出来观察细胞就基本都变圆了。* Y  M, v9 x5 m: ~
建议你原位用免疫组化检测一下。

wind789

henryjia 发表于 2012-3-7 21:17
* f8 j1 s/ e* K. ]似乎有很多圆形成骨细胞，怎么去除呢？' i+ B! w8 i3 t; E7 n. U
, P# ?9 j" O/ s
说明一下，我是希望可以从脐带血中提取MSC

1 P) ]$ s1 t$ Q' L; N这种细胞不好消化，温箱半个小时都不行。直接细胞刮刀吧。

刘艳85

先用生理盐水将细胞洗涤一两次去除残余的培养基，然后再用胰酶消化

穿越地平线

最多3分钟

穿越地平线

建议0.25%的胰酶-EDTA

henryjia

脐带血
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542177563

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你好，请问你是什么来源的EPC？