请教：终止胰酶消化作用的办法

上帝帮我转运吧

大家好，一般用血清终止胰酶消化，如果用无血清培养，该用什么终止消化呢？知道有一种胰酶替代物可以不用终止，但是相比好贵啊。不知道能够抑制胰酶作用的东西都有哪些？在这里先谢谢各位的回答了。

cartoonyang

) p& d: F9 J. m- S# d. `- ^: H

quit6927 发表于 2012-3-13 10:17
' O* X; C6 \6 U1 n: u: i/ J4 T胰酶替代物 TrypLE貌似不是很贵吧，比一般的trypsin/EDTA贵一点儿

- Q! f0 {2 A% G) f6 @3 Q6 _1 @% U1 [; _3 I$ L: A, R6 Y& \7 c
我也觉得。6 E9 }" ^/ V6 s2 c1 g" @' p3 a
你买无血清培养液都行，为何TrypLE不买。一般买时要配套买，这样才保证你的消化，培养效果啊。( k6 a+ G  V" Q/ \8 y* C
我用过，很好用的。

wuzhoulingxiao

用FBS（或FCS），即血清，可以终止胰酶消化。

w343989328

不知道楼主最终有没有总结出什么有效的方法？

levell

加入胰酶后，当细胞开始皱缩，马上把胰酶全部吸出，贴壁比较牢的可以加入少量PBS漂洗一次，不牢的直接用PBS吹打下来，离心后重悬培养就好，残余的胰酶的量不会对细胞有太大影响的，有文献对比过不终止消化，直接加入10倍体积的培养基培养，细胞没有明显变化

南宫燚岚

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" ^  p# `! j/ c# ~$ f当然，0.05%也是一种常用浓度，对于较脆弱的细胞来说

上帝帮我转运吧

回复 BDFCM 的帖子7 N/ e: f# q9 C2 \6 R
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谢谢您的建议！

上帝帮我转运吧

回复 金戈 的帖子
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哈哈，用旧培养基我喜欢。是不是先离心一下比较好些。在时间充足的话。

crazytime

有些无血清培养基可以当作中止液使用，可能是添加了胰蛋白酶抑制剂或加了蛋白。
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BDFCM

楼主闲麻烦的话，就用TrypLE吧，消化结束后，加2-3倍体积的培液，把细胞吹散，离心就OK了。TrypLE也不贵