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楼主: wangsandan0503
go

HUC-MSCs细胞培养状态怎么控制?   [复制链接]

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发表于 2012-3-14 21:21 |只看该作者
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回复 wuyannini 的帖子3 q- u, p* r# A* ]/ A" v
( M3 d3 Q5 D/ o+ T
您的回答基本解除我的困惑   谢谢多多交流   我是天医的   希望和您成为朋友。邮箱wasonthinking@163.com

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发表于 2012-3-14 21:19 |只看该作者
回复 Tim 的帖子
" F1 f! u; D* J. G
! r7 y- p" i  v您的回答矛盾啊   

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金话筒 优秀会员

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发表于 2012-3-14 20:43 |只看该作者
你的HUC是人的吗???细胞黑点你可以多洗几次!但要注意吹打的力度!不然会弄坏细胞的!胰酶消化注意掌握好胰酶的消化细胞的程度!一般肉眼可以看到培养瓶底变白时!立马吸出胰酶!等2MIN左右轻轻拍打瓶底!细胞开始脱落就可加终止液停止消化啦!切记吹打细胞力度要适度!动作要轻!
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小小研究员

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发表于 2012-3-14 20:24 |只看该作者
MSC一般3到4天可以长的比较密了。楼主的这种情况以前也遇到过,可能是胰酶消化的时候没控制好时间,也可能是培养液的问题或者细胞自身的问题,建议楼主做个对比试验看看。。。
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发表于 2012-3-14 19:37 |只看该作者
1、刚开始培养细胞最好是间隔2天再给细胞换液,我的经验是这样。5 T) U; Q( h: r6 F" y; C+ p; ]
2、细胞传代,消化过了,或者消化不够而机械损伤比较大,会影响传代
4 D) \* K3 p) [% C3 @" \3、细胞的接种密度,也会影响细胞的生长,不要过稀。
( P5 X* `  F7 j$ j4、离心速度时间我一般是用1000rpm,效果还可以。
  _: W& \* E! d5 a5、细胞生长状态跟是用培养皿还是细胞培养瓶没有关系
$ E8 l0 y+ U$ x" L3 e* Y; P7 u0 h6、至于说细胞培养基里面总是有很多黑渣子,我的实验中还真没这么明显,具体原因俺不清楚。
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发表于 2012-3-14 16:05 |只看该作者
回复 金戈 的帖子. I4 H8 g) }6 n( c5 W( U
' J' E( p" l9 R6 A2 t* A
你说出了我的心声,谢谢大牛。

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发表于 2012-3-14 16:03 |只看该作者
本帖最后由 wangsandan0503 于 2012-3-14 16:06 编辑 7 \6 d$ V% ^$ u' k- C3 g; ~

/ z; p) X- f- @9 ~# ]7 i+ Z' e. R回复 wind789 的帖子: o. \* p9 c2 |& @

, X3 p. f( w, g) b* F+ o9 ]5 m8 z对  你说的很对  和我的一样。您的联系方式?

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发表于 2012-3-14 11:53 |只看该作者
回复 wind789 的帖子
, ?8 o6 f- h+ W) S) L$ J/ Q5 L. W# Z' y# \$ |0 W" H- [. L. u
采用高级模式    附件上传就可以了

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发表于 2012-3-14 09:38 |只看该作者
wind789 发表于 2012-3-14 08:41 : S( k* F. z$ [7 X2 a1 g9 ]/ Z, J# k
第一张是贴壁第二天?第二张是贴壁第四天,满得过度了?+ P  @2 k6 k$ j6 N7 w
和我用DMEM+FBS培养的状态很像。

2 r0 k7 \" g) W5 D7 J' u0 m想附上实验图2张,不知如何上传。望提示!

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发表于 2012-3-14 08:41 |只看该作者
wangsandan0503 发表于 2012-3-13 09:38
0 J# k. g. z' i5 Y% L5 k5 P刚开始培养hUC-MSCs细胞,什么时候换液,是2天还是3天,师兄教诲说是2天换液,自我感觉如果2天换液的话,细 ...

$ O, {9 e2 B/ u. Z第一张是贴壁第二天?第二张是贴壁第四天,满得过度了?
: n* m1 ~; i2 D2 q* S和我用DMEM+FBS培养的状态很像。
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