请教一个问题 为什么基因打靶要用雄性ES细胞系

cicadacjk

这个太容易解释了，你自己想象一下操作过程就知道- X- O) G) w* L& ^2 T  V! a7 I( l
敲除的限制步骤是germline transmission
0 K) m8 R* E9 ~+ Z( G( F说到底，这就是茶壶和茶杯的关系

wlj0912

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雄性的小鼠一旦出现嵌合鼠了，可以和很多母鼠交配，F1代比较容易出现

qizhi502

因为那个时代转基因动物的出生所使用的是嵌合的办法，嵌合动物的出生雄性概率和存活率都很高，但是克隆和四倍体嵌合技术较为完善的话，也可用xx的细胞系

colindream

刚开始接触 干细胞，对 germline transmission 实在是不太理解。
1 l$ Z  v+ a3 M. G我现在刚开始做 gene targetting,,现在筛选 ES 阳性克隆。$ {0 w. H7 V) k5 T

% L" m5 p4 {9 E' d( @$ L2 _% I9 xgermline transmission 的理解，实在是没有概念，。，。
5 ?4 ]9 k4 G% `8 R3 _: t6 N望大侠 指教！！！

colindream

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; ^7 K9 s* u7 X4 a( c! r* I! d& ]刚开始接触 干细胞，对 germline transmission 实在是不太理解。 # U7 V6 Z3 W! i* g* X/ r. w
我现在刚开始做 gene targetting,,现在筛选 ES 阳性克隆。
: F+ `1 [! _; l+ _6 a- W8 J- C+ i* f4 B
germline transmission 的理解，实在是没有概念，。，。
3 E  p& Z6 T" v望大侠 指教！！！

细胞海洋

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: v* y. L" J6 H0 F# g建议你发新帖提问

usepray

长期以来做基因打靶一直接在小鼠等动物水平,而打靶效率很不一致,很少情况下能得到一个等位基因打靶的细胞系,所以通常的做法是将一个等位基因打靶的细胞系(ES)培育成小鼠,然后将其与正常(通常带有重组酶)异性交配,有1/4概率得到两个等位基因打靶的纯合子后代; 如果起始用的一个等位基因打靶的细胞系(ES)是母的,一次交配只能产生一窝;如果是公的,你想想可以多少窝,这样可以保证拿到或拿到更多纯合子,这就是germline transmission.5 D9 o2 I6 j+ b6 s& l  B
但是随着打靶技术的发展,在人等高等动物细胞水平也可以实现打靶后, 伦理上你不能培养克隆人,不存在利用germline transmission产生纯合子的可能性;所以用XY的XX的(如果不存在什么易于同源重组的说法,这个还真不了解)都一样了,可以看到文献中有用H1也有用H9或其它人的ES细胞系.

concentrate123

应用雄性的比较好吧，建系成功如果想对y染色体进行基因修饰，用雌性岂不是不能处理？

qq007www

还是看你打靶的基因在哪吧，但好像说雄性细胞基因稳定遗传性较好& z6 L* w) s! s1 `) J; r' p