干细胞培养中添加因子的作用

fanmihu1987

本人刚刚开始接触干细胞，目前还属于蒙圈状态。* u5 x6 M! C- C2 r( i0 c
想请教各位良师益友3 }" m& Z: G: m8 B
在干细胞培养中添加的物质 LIF，BFGF，2-巯基乙醇，L-谷氨酰胺
4 Q( l, U. ]% D4 Q8 N1 d$ w+ e# l  Q4 {, U的作用都是什么？
+ I5 M4 g, s& b! Y+ B# ?1 |1 N' g另外我目前在诱导成纤维细胞恢复到类干细胞状态一直未见类干细胞的集落生成。我使用的是普通的DMEM+FBS，没有添加因子，不知与此是否有关。

daxi-fighting@1

回复 BNJN 的帖子$ U" x3 i: `/ G

; B! @5 w6 a9 J$ p$ T3 Y8 S& U好，谢谢你指点，9 V4 J) @; |' v+ k- ^$ [; S

daxi-fighting@1

回复 子墨o0 的帖子& F: [$ Q7 ?* O$ M+ P
* p: N; Q( I1 n& }! I% _
那乳牙牙髓干细胞您培养的时候用的是DMEM还是a-MEM的基础培养基啊？有没有添加什么抗坏血酸啊？无血清的培养基是专门的公司的吗？

daxi-fighting@1

回复 liluli0715 的帖子, a7 D) H! C; ^, m1 w4 H* n

# v. G+ |; ]" n" i/ |. I好，那那个抗坏血酸我先不加试试。

daxi-fighting@1

回复 jessewill 的帖子1 q# W4 \" }7 s+ @' C
) P6 [- U* [4 N. F
好，还是谢谢你啊

子墨o0

我们一般是在基础培养基中添加15%的FBS来培养乳牙牙髓干细胞.而脐带间充质干细胞则是加10%的FBS或者用无血清培养基.

BNJN

养human ESC要加bFGF，维持干性防止分化；养鼠的加LIF，也是防止分化，二者具有种属特异性

随风的天使

回复 fanmihu1987 的帖子' F" X! C% P& K6 E! r

/ r' Q1 Z# r0 ]3 U通常干细胞培养时添加的Lif，bfgf作用主要是抑制分化，成纤维细胞自身也有分泌抑制分化因子的作用，所以在很多的胚胎干细胞的培养时都是用成纤维细胞作为饲养层来培养细胞。巯基乙醇的作用主要是促进胚胎活着细胞贴壁。谷氨酰胺酶，是有一定的半衰期的，所以配置好的液体一般2周左右未用完，则需在培养液中补加适量的谷氨酰胺。  Y7 S6 g% F+ v
你的成纤维细胞诱导液如果是单独的DMEM+FBS，没有特别的诱导成分，应该是很难出现类干细胞的集落的。我培养成纤维细胞的培养液就是简单的DMEM+FBS。希望能帮到你。

liluli0715

建议先不要加一些额外的因子，我们做的是脐带msc，只是基本培养基加10%FBS，你可以先培养试试

jessewill

回复 daxi-fighting@1 的帖子
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$ P* M% X' C8 R; M, Z$ Z7 {sorry,你的问题我真不知道额，我建议你查查别人的protocol，你的这个东西我没听说过啊