间充质干细胞在传代消化时用EDTA胰酶效果好还是用胰酶不加EDTA的好? - 间充质干细胞专区干细胞之家



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查看: 77089\|回复: 11	go 间充质干细胞在传代消化时用EDTA胰酶效果好还是用胰酶不加EDTA的好? [复制链接]

yingjie

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楼主

发表于 2012-3-29 15:25 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

本帖最后由细胞海洋于 2012-3-30 00:55 编辑 * m2 Q7 j/ b2 P+ r/ y/ Y

间充质干细胞在传代消化时用EDTA胰酶效果好还是用胰酶不加EDTA的好?知道其中原理的帮忙分析下，谢谢

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zhj1988

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沙发

发表于 2012-3-29 16:03 |只看该作者

加EDTA效果好点，EDTA是Ca离子螯合剂，促进细胞脱壁，消化效果还可以。

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Demon_CN

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藤椅

发表于 2012-3-29 16:06 |只看该作者

加EDTA好,2价离子会抑制酶的活性，EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子。加了可以保证酶的活性

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板凳

发表于 2012-3-29 16:06 |只看该作者

加EDTA好,2价离子会抑制酶的活性，EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子。加了可以保证酶的活性

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yingjie

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报纸

发表于 2012-3-30 10:29 |只看该作者

回复 zhj1988 的帖子3 E t+ |! s+ R
/ H# k) m+ T; |( m0 S" ?
加了EDTA会不会对细胞产生不良影响呢？

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zhj1988

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地板

发表于 2012-3-30 12:47 |只看该作者

回复 yingjie 的帖子6 H( z n' P/ h6 h

影响肯定有的，但是你可以用血清终止消化然后离心去除就没事了，我是这样用的，细胞状态还好。1 h; _0 E, |3 Z. [* t! j

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Tim

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7楼

发表于 2012-3-30 15:42 |只看该作者

建议合用！我用的就是混合的感觉效果很好！胰酶对蛋白质有水解作用主要作用于赖氨酸或精氨酸相连接的肽键！使细胞间质中的蛋白质水解使细胞分开！EDTA能与细胞上的钙镁离子结合形成螯合物，利用结合后的机械力使细胞变圆分散细胞或使贴壁细胞从瓶壁上脱离，缺点是细胞容易裂解或贴壁细胞从瓶壁上脱离是呈片状！- s! ^8 e' j- w1 C- R C
胰酶和EDTA混合使用（1：1或1：2），有利于细胞的脱壁和分散！还可降低胰酶的用量和毒性！