用H-DMEM+15%FBS养IPS好，还是DM/F12+20%的KSR养好

细胞学徒

刚刚开始养IPS，状态养着养着就不好了。克隆变散了，也不是圆或者椭圆的了。克隆也不紧密了····大家给点指点，谢谢
% b- O, ~  b: d; z" r还加的因子有1%的non-AA，1%Glu，千分之一LIF，千分之一的b-ME

细胞学徒

题目打错了，是15%的KSR，非20%

前途似锦

真有钱 加这么多lif% P) Y# g0 T: @( a$ o

zhusealin

你养的是鼠的ips吧，用的FBS是ES级别的吗

细胞学徒

回复 前途似锦 的帖子$ `" M. @9 h$ D4 {7 ~

$ q3 a- d9 d, s' u实验室师兄师姐是加这么个量的····俺也不知道

细胞学徒

回复 zhusealin 的帖子' R/ s5 z  I; n. |9 J: z+ l
. o0 O' n, ?9 t# Q- j" ^
是小鼠的IPS，FBS应该不是ES级别的，我见他们养MEF也是用的那种血清

genedu

若是小鼠iPS的话，当然是完全按照小鼠ES培养体系（FBS+lif）即可。没有必要用KOSR。FBS最好是用GIBCO的ES级别

细胞学徒

回复 genedu 的帖子) |* D' F$ g2 z  `

( b. u- |3 n" h0 oFBS用15%的？LIF加多少？谢谢，1%的non-AA，1%Glu，千分之一的b-ME可以吗？

jas0511

我也是一位新手。现在正在做FYP。15% ES-FBS 和 15%KSR 我都有用过。用kSR, IPSC clone 长得较快。我也是用千分之一的lif。这是我导师教我养ES 细胞的media(500ml): 15% ES-FBS, 1% NEAA, 1% L-glu, 910uL B-me （我也不清楚为什么特别要用这个量）， 还有千分之一的lif。

genedu

FBS(GIBCO cat NO:16141,26140)用15%的，Lif final, 1000 units/ml，1%的non-AA，1%Glu，bME final, 0.1mM，丙酮酸钠我建议也是要加的（1%），还有双抗，新手防止污染。还有再加点儿VC，也不错，因为这种东西太便宜了。