求小鼠12.5dpc雄性生殖脊消化成单细胞，多少能达到10^8？

chenchunlei

   同题，谢谢

hcluo

请教一下楼主，生殖脊细胞是如何取出来了的啊，需要如何饲养？谢了！

chenchunlei

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7 g! j1 I1 S" l  \; q不好意思我没培养过生殖脊

yangpan521

1.首先，从见栓那天开始计时为0.5d,12d后取孕鼠颈椎处死后，剖开腹腔 取出胎儿（一连串的）放在培养皿内 。
' ~6 S$ Q$ J* O* ^2.在超净胎内用75%的酒精浸泡1min,然后用生理盐水清洗干净。
( v4 P+ W* `+ p8 H! f' u2 n1 O7 z1 g3.用无菌的镊子慢慢剥去胎膜、胎盘等暴露出完整的胎儿。
* g. m0 i0 E9 v! Z4.取一新的培养皿，放入生理盐水或者DPBS（含双抗），将胎儿放置其中。. k0 ~9 c2 L* }' @
5.在体视镜下，用两个油丝镊轻轻分离生殖脊，胎儿很脆、已破碎实验应很小心，胎儿的腹部有点红色（为内脏），找到肾脏，紧挨着的就是生殖脊，
: _; E2 ]+ A2 J$ ~8 A. K9 S% g12.5d的胎儿生殖脊彼此挨得很近，呈长条状，雄性外观可见里面呈条纹状。# h8 R4 @4 S! U! O) _
本人的实验，仅供参考。

xiangchou812

yangpan521 发表于 2012-4-6 09:22
/ o. E. _. h! I2 O$ P- I- k. m! b1.首先，从见栓那天开始计时为0.5d,12d后取孕鼠颈椎处死后，剖开腹腔 取出胎儿（一连串的）放在培养皿内 。 ...

: T1 U$ N9 @7 W$ ^。赞一个！！！！

hcluo

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, S% L# f3 ~: q, }6 k, W1 |$ Y8 m* ?
谢了啊，生殖脊与肾脏有颜色区别吗？有图吗？

yangpan521

今晚我传上照片给你看看吧

chenchunlei

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. u% b3 F7 [1 |0 H4 l5 R" s) L# V6 a  X- c& d/ N5 b* }$ }9 o* D+ `7 Q
小鼠胚胎操作手册上有

hcluo

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" o: z: [* j: q+ x/ Q' o$ ~9 D* I: ?
好的，谢了

yangpan521

回复 hcluo 的帖子" u# ~7 h6 ^1 K3 p+ [
; G" R6 _. X1 _8 j6 F
今天实验室的电脑出了点问题，图片没考出来，明天我再试试，不好意思了