慢病毒感染细胞

huangcong1988

诱导iPS，病毒滴度测定后，要感染供体细胞了，但是不知道病毒颗粒与细胞数目的比例，文章中都没有提到说病毒颗粒与供体细胞比例，但是个人觉得病毒数目跟供体细胞数应该是一点比例的，不然就没有必要测定病毒滴度了，也没必要浓缩慢病毒了，所以想知道大家一般感染细胞的时候病毒与细胞数目比例是怎样的？怎么确定呢？

huangcong1988

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7 \3 b  T  ?# T( W* X谢谢，我是做iPS，现在滴度已经测定了，准备感染细胞，但是现在不知道病毒用量，就是说不知道病毒颗粒数目跟供体细胞数目的比例，所以想知道大家在感染时是怎样确定病毒与细胞比例的

huangcong1988

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. S( ?% K( L; |我的质粒不带荧光，所以我测定病毒滴度的时候只能用定量，所以就没有测MOI，还有MOI是什么指数？我直接测定的是病毒颗粒数（当然也包括不具备感染能力的病毒）。由于我的质粒不带荧光，所以没法肉眼看感染效率，请问，这样该怎么办呢？怎么摸条件？你们一般感染的时候病毒用量是多少呢？跟细胞是几比几？

huangcong1988

回复 不倒翁 的帖子0 O' m* J6 _! Y4 a5 V

, v  z: ]) ?! [6 i我这个载体不带荧光啊，所以没法目测感染效率，所以只能用定量测滴度，然后再摸条件，摸病毒与细胞比例，不过我觉得这个麻烦，所以想问一下大家，一般是什么比例？个人觉得应该是病毒比细胞多吧？还有，各个病毒比例不是1:1么？你是说包装病毒还是用病毒感染供体细胞？

huangcong1988

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非常感谢

huangcong1988

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+ T* s# k) @6 n3 U/ D谢谢

huangcong1988

回复 shihuijunm 的帖子* Q8 H8 Q- V5 @' v. T6 M2 I% b
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谢谢你。我的质粒是不带荧光的，我用定量测定滴度（最后单位是：单位体积里面病毒颗粒数），不是MOI这个指数，所以我只能按照病毒数与细胞数比例做感染，有什么办法能转换MOI这个指数跟我的滴度单位吗？还有，如果要买带荧光的质粒，在哪里买呢？是addgene吗？准备换质粒，我这个质粒系统太落后了

huangcong1988

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没，我用定量测的，所以不算准确，但是基本能反应问题（提RNA，反转录，定量，有些RNA没提出来，但是也有些病毒没有感染活性），这个办法很费时费力，但没办法，不带荧光，只能这么苦逼啊

huangcong1988

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, C& l$ {) Q% l* X9 u- [/ a恩，准备换呢，如果要买带荧光的质粒，在哪里买呢？是addgene吗？

huangcong1988

回复 rexhz 的帖子: y4 t: @" k& _9 E" `" t
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哎，现在感觉国内做实验很少有无私的，很少能有把资源贡献出来的，想想真的还是比较钦佩国外的实验室，我现在用的这个质粒是师兄之前从国外写信索要的，人家连邮费都没有要，虽然这个系统很落后。心里不知道什么滋味，你是买的么？