细胞不贴壁~~求助！！！

精神病院小蘑菇

1、饲养层细胞传代培养后（10cm dish 1传5）第二天观察全部漂浮在medium 中，不贴，台盼蓝染色发现细胞只有部分死亡，大半都是活的，收集后重悬铺板，观察至第二天依然未贴壁。4 ?2 `* l, v) P) ?: E% o; T' }$ a
2、换一块饲养层细胞传代培养6h后发现，三板贴壁很好，两板不贴壁，排除medium，trypsin的问题，细胞显微镜下观察未见可见污染，贴壁细胞第二天观察生长良好，未贴壁细胞仍然为贴壁。培养皿为BD公司10cmDish，同一箱同一包，之前使用没出现过问题。9 d, S! P$ p2 P7 @
神啊，想不出来什么问题，各位帮我想一下吧～～～不胜感激～～～　

luoziwei

dish有问题吧？即便同一包装的，但里面每个dish的处理也未必一样。

精神病院小蘑菇

回复 luoziwei 的帖子
4 A3 Q5 M" N6 W) K6 S. V, O; L% T+ p7 H  {; ~: u
不知道呢，以前也没出现过这种情况~~~

抹了个茶

可能是培养液的问题 ph不对

yyshpy

找你说的情况，就是板子问题啦，有些细胞确实对培养板敏感，培养板质量也不齐，很多人为了细胞贴壁，可以用明胶处理一下培养板，你不妨试试

future007

你换一下康宁的板子试一试，这个实在不好说为什么。

前途似锦

你看看是tissue culture板子吗？我们实验室就有人用错过，拿光板养就是不贴壁 呵呵

精神病院小蘑菇

再次传代培养，同样的细胞，培养液，BD的10cm板，同样的操作流程，六小时后观察，细胞全部贴壁生长良好，未用明胶处理，哎~~~估计就是那几个板子的问题了~~~继续观察~~~