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[讨论] 蛋白酶切求助 [复制链接]

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发表于 2012-4-19 22:34 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 zhenhua 于 2012-4-19 22:37 编辑
; g7 b$ z9 T; g! R9 N
5 y; }1 b7 K- ^9 ^+ s大家看看我的蛋白酶切图) y& a' ~0 u; \' h; G% `
我用trysin酶切后,SDS-PAGE,中间是酶切前,右边是酶切后。酶切后发现,最下面10kD条带附近还有蛋白存在,正常吗?: a& Q% x' r* i1 F/ w3 H1 w1 n6 {
是不是有些蛋白没有切完全?还有所有蛋白都切成10kD左右了?3 {: x' ~% M$ i( g1 d
还有一个奇怪的是,酶切前的样品从下面开始数,第二条带一下就没有蛋白条带了,为什么呢?这个样品是全细胞裂解物,在变性裂解液中(50mM Tris,50mM NaCl,8 M urea)裂解。
" T2 f% x* n- K" N$ z% w谢谢!* g( _) |- U4 F
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