feeder铺稀了 消化下来重新铺可以吗

573639471

RT 铺了1个六孔板，过夜贴壁后发现细胞有些聚集，怀疑是消化后没有吹散，密度有点小，如果消化后6个孔合成三个 可以吗2 z: H; h0 D# }1 E- R% s
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chenks

我觉得消化下来再种可能不太好;我一般都在孔里补种一些feeder的

也行天下

铺稀了，再复苏一管补铺一下应该更方便一些。对细胞状态也没有什么影响。我觉得如果铺密了的话，可以试试消化下来重新铺。

wangyimei

不需要消化下来，根据目前饲养层细胞的量，看看大概还需要补充多少，再复苏一下直接往上面补充所需的细胞量即可

chentian820

有gelatin，不好消化吧！

南宫燚岚

回复 573639471 的帖子  {! b+ b1 a. t  }/ y2 ~  g4 S) }

8 d* B& Y4 k( {* X之前这样做过，效果不错，算是经验吧

frankieisme

我用过ACTT的SNL细胞,不特适合iPS的feeder,最好的还是MEF,只要没有用丝裂霉素C处理过,重新消化铺板应该是没有问题,如果处理了最好还是不要用了.

huangcong1988

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feeder还能再增殖？饲养层还能传代么？feeder不是不能增殖么？黑色渣滓多的话是挺烦的，在制作饲养层之前细胞里面就有不少，完了制成饲养层之后，里面黑点反倒少了

573639471

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有根据还是有经验？7 r2 o0 B& ~1 J- J! M6 ?6 S
能告诉我为什么吗

573639471

回复 huangcong1988 的帖子6 f; Z- `) n4 X- K5 Y) s
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我主要是看细胞的形态，梭形或三角形，增殖速度较快，一般2-3天传一次，里面的黑色渣子的多少。黑色物很多人说是细胞代谢物，我养的里面挺多的，一直都没有很好的解决，特别是灭活后的细胞。