养细胞的一些疑问

huangcong1988

养了小半年细胞，对于细胞培养现在越来越多的疑惑7 z+ ^8 i* D2 w- S. p
1，细胞培养箱的温度跟二氧化碳浓度对于成纤维细胞或者其它类型细胞影响很大么？（比如，一个下午二氧化碳浓度都没达到4%，或者细胞培养箱门被人打开了一下午，忘了关）
: |; C2 R- K. ?# |# n7 d) T7 `$ f2，血清，血清对于细胞培养影响时很大的，具体有哪些呢？（我之前细胞复苏的时候，细胞贴壁，但是越长细胞越脱落，这个是血清原因么？如果是血清问题，细胞应该不会贴壁才对吧？）
3 b. R3 r$ c9 \0 x3，培养箱湿度对于细胞培养影响大么？（我们之前细胞培养箱底一般都倒一些水，然后加些许无水硫酸铜，现在不加硫酸铜了，只加水感觉培养箱里面湿气很大，很闷热），细胞现在长得很慢，而且也是很多脱落的
3 y$ j( [& ^: @" S  h0 ~4，细胞瓶里面的圆的，光亮的细胞是死细胞么？现在细胞瓶里很多这种细胞，有的人说这是正生长快贴壁的小细胞，个人估计是死的脱落的细胞，每次换液都会洗一下，但是洗了后还是有这样的一些细胞，不知道这是怎么回事: b% o. `+ @' Z! k
5，血清，还有KSO等等这些的，在拿进细胞室需要用紫外照么？不照的话感觉不能消毒，可能会带进污染源，照的话，血清中蛋白又可能变性，肿么办？# M9 w* P% I9 t1 A9 K
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& z+ N2 x* E. s4 f补充内容 (2012-4-23 09:48):# ?* X+ c# Y" e& x. M" D) p1 l* i# U
补充一点：换DMEM，对于细胞有影响么？都是高糖的，不过一个是国产的，一个是hyclone的

huangcong1988

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4,光亮细胞很多呢？就是说这边细胞细胞在贴壁，另外一边细胞又脱落了，很郁闷啊，细胞长得很慢，跟之前没法比，之前成纤维细胞两天不到就能传一代，现在四天左右还只是80%不到。
% g- a6 P# A$ N3 N/ g# i1，就是说主要是PH对于细胞影响比较大？那影响PH的主要原因是什么呢？除了二氧化碳浓度和细胞自身生长，我们细胞长得慢，应该不会是细胞代谢导致的

huangcong1988

回复 receiver1 的帖子
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! X" ^" P( S; i' f4，漂浮洗吧很多怎么办呢？肉眼看培养基是看不到什么问题的，但是培养瓶一动就见很多圆的细胞，这是脱落的么？很多，大概能有贴壁细胞的20%左右，但培养基也没变黄

huangcong1988

回复 yuhaoze 的帖子
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. E; ?" L; U( X7 I. E% ^+ \我用T25瓶养细胞，瓶盖都是旋得很紧的，但是还是很快变紫，这是为什么呢？主要是细胞还长得不快。

huangcong1988

回复 yuhaoze 的帖子& V4 G  U3 U! K8 r, |7 _/ I0 d) _
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复苏时，细胞密度也不小，但是长得慢，一直找不到原因，换了培养箱，换了血清，但是细胞一直长得慢，而且培养瓶里面很多圆的细胞，一边长，一边贴壁，一边又脱落，这让人很纠结啊

huangcong1988

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滤膜？神马东西？corning瓶里有么？

huangcong1988

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4 u! Z+ G, u7 S7 B4 |& X) O
( @( @* a/ ?. h培养基我基本都是两周内用完，但是T25瓶盖有没有滤膜我不太清楚，corning的，那种橙色瓶盖的，不知道有木有

huangcong1988

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) H" {7 p6 ~2 h" q9 s& x3 h4 x5 J8 K) F" |
谢谢