谁能提供下细胞的proliferation和Doubling time和colony formation的实验protocol

sarah19860420

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# J# A( m6 h1 z" W4 X谁能提供下细胞的proliferation和Doubling time和colony formation的实验protocol。Proliferation想要那种经典的试验方法。不是MTT的。如果没有，MTT的也可以。谢谢~~

DNA

Proliferation经典的试验方法是指SRB法吗？

DNA

Soft_Agar_Colony_Formation.pdf (5.79 KB)

2012-5-1 15:56 上传

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sarah19860420

回复 DNA 的帖子; S( Z& }5 B9 j% x/ @
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我看了一下，这个SRB法是不是关于悬浮细胞colony形成的经典实验呢。我不是很了解。实验室的老师说计数法就是计算细胞增殖的经典方法。但是我没有查明白具体怎么操作，怎么计算。不知您是否有相关的步骤呢。谢谢

laurel101

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# T5 D' ^  ~( ~7 N9 T0 d- ^回复 sarah19860420 的帖子) F" t8 {% V+ i* D0 f+ G
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前不久刚做过生长曲线，做法仅供参考。
, t, u' k; _8 h* M. r. }  l: d* n1.取生长良好细胞，消化，用新培养基制成细胞悬液后计数。2．铺板，6孔板的话，根据细胞增殖快慢可取2万左右细胞每孔，每孔需要三个复孔，测7天，即需要铺21孔。同时测2株细胞的话就可以共铺7块6孔板，每天取出一块计数。　3．24 h后开始计数，每次消化3孔细胞，以后每隔24 h计数一次，计算平均值。连续计数7 d。 　　4．根据细胞计数结果，以单位细胞数为纵坐标，以时间为横坐标绘制生长曲线。Doubling Time公式:DT=t*[lg(2/(lgNt-lgNo))] No：起始细胞浓度；Nt：最终细胞浓度；t：培养时间。起始细胞浓度以即将进入对数生长期时浓度为准，培养时间也是即将进入对数生长期后培养的时间。  

huangcong1988

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能具体解释一下那个doubling time 的公式么？谢谢

sarah19860420

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! L1 h$ H+ m3 w9 s/ d7 x2 a谢谢