关于feeder、MEF和mTeSR

gaoyuanwind

请问大家使用的MEF细胞都是自己用孕鼠分离的么？有没有买现成的MEF细胞的？另外，不适用feeder的话用mTeSR的效果怎么样？这三种方法的成本差别有多大啊？# |$ `9 a& w! Q; X- E, Z
正准备开始做ips了，希望各位学长和老师们不吝赐教！

zhusealin

成本比较低的还是自己用孕鼠分离MEF，一只孕鼠就可以冻存很多MEF。用mTESR培养ips的成本会比较高

希望之光

个人感觉用feeder要好的多！自己做想用多少用多少，当然了得提前检测是否含有支原体等等
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cochongg

:)当然是自己分离成纤维细胞成本低啊，

sdjjfangfang

Feeder是买的孕鼠，然后自己实验室分离，培养，照射处理的。9 R7 d) U0 k+ V: ]
mTESR对于feeder free的培养还是不错的，但是要配合适的Matrigel。/ S# k$ T( F7 |+ g/ l0 r2 T( b
一般长期维持培养，我们会选择在feeder上进行。但是有时候实验需要（类似分化，要去除MEF的影响），会先在feeder free上培养一段时间后，再进行相关的诱导分化。一般做iPS还是保守的会在MEF上进行。

chentian820

有些实验需要是不能用feeder的，建议做一些condition medium， 效果比mtesr好，成本中等。注意要铺matrigel。- [2 M; ~+ c) o7 A
如果要用feeder， 最好还是自己做，你买的feeder质量不一定可靠，说不定已经是4-5代的MEF，尤其是国内的供货更水。

lcxlorna

同意大家的说法，自己做的较保险，做一次能用好几年。

sciencesky1

回复 sdjjfangfang 的帖子' Z! f$ D" U1 q- n5 j' J% ~0 z
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您好，我是刚刚接触TS细胞，计划用MMC处理后的MEF细胞做饲养层，我想请教一下，TS细胞传代时怎样将其与饲养层分开，用什么消化，消化时间大概多久？谢谢