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查看: 30075\|回复: 8	go 关于feeder、MEF和mTeSR [复制链接]

gaoyuanwind

新手上路

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楼主

发表于 2012-5-10 10:50 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

请问大家使用的MEF细胞都是自己用孕鼠分离的么？有没有买现成的MEF细胞的？另外，不适用feeder的话用mTeSR的效果怎么样？这三种方法的成本差别有多大啊？/ ?, t7 Z- I1 b$ c
正准备开始做ips了，希望各位学长和老师们不吝赐教！

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jedicheung 发短消息加为好友 jedicheung 当前离线积分 22 威望 22 包包 129 头像被屏蔽禁止访问积分 22 威望 22 包包 129	沙发发表于 2012-5-10 11:13 \|只看该作者提示: 作者被禁止或删除内容自动屏蔽

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zhusealin

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藤椅

发表于 2012-5-10 15:51 |只看该作者

成本比较低的还是自己用孕鼠分离MEF，一只孕鼠就可以冻存很多MEF。用mTESR培养ips的成本会比较高

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希望之光

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板凳

发表于 2012-5-10 20:09 |只看该作者

个人感觉用feeder要好的多！自己做想用多少用多少，当然了得提前检测是否含有支原体等等

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cochongg

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报纸

发表于 2012-5-10 21:26 |只看该作者

:)当然是自己分离成纤维细胞成本低啊，

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sdjjfangfang

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地板

发表于 2012-5-10 21:29 |只看该作者

Feeder是买的孕鼠，然后自己实验室分离，培养，照射处理的。
mTESR对于feeder free的培养还是不错的，但是要配合适的Matrigel。
一般长期维持培养，我们会选择在feeder上进行。但是有时候实验需要（类似分化，要去除MEF的影响），会先在feeder free上培养一段时间后，再进行相关的诱导分化。一般做iPS还是保守的会在MEF上进行。

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chentian820

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7楼

发表于 2012-5-11 12:08 |只看该作者

有些实验需要是不能用feeder的，建议做一些condition medium，效果比mtesr好，成本中等。注意要铺matrigel。2 q2 B- `7 G" R# f# [8 s! [1 b
如果要用feeder，最好还是自己做，你买的feeder质量不一定可靠，说不定已经是4-5代的MEF，尤其是国内的供货更水。