干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 29976|回复: 8
go

关于feeder、MEF和mTeSR [复制链接]

Rank: 1

积分
20 
威望
20  
包包
84  
楼主
发表于 2012-5-10 10:50 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问大家使用的MEF细胞都是自己用孕鼠分离的么?有没有买现成的MEF细胞的?另外,不适用feeder的话用mTeSR的效果怎么样?这三种方法的成本差别有多大啊?
0 p( `7 U, ]0 {+ r0 Q6 Q正准备开始做ips了,希望各位学长和老师们不吝赐教!
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

头像被屏蔽

禁止访问

积分
22 
威望
22  
包包
129  
沙发
发表于 2012-5-10 11:13 |只看该作者
提示: 作者被禁止或删除 内容自动屏蔽

Rank: 3Rank: 3

积分
740 
威望
740  
包包
1597  

金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2012-5-10 15:51 |只看该作者
成本比较低的还是自己用孕鼠分离MEF,一只孕鼠就可以冻存很多MEF。用mTESR培养ips的成本会比较高
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
347 
威望
347  
包包
942  

优秀会员

板凳
发表于 2012-5-10 20:09 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
个人感觉用feeder要好的多!自己做想用多少用多少,当然了得提前检测是否含有支原体等等# |1 d: Z3 }- Q. ~% k
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
396 
威望
396  
包包
230  

优秀会员 金话筒 热心会员 小小研究员 帅哥研究员

报纸
发表于 2012-5-10 21:26 |只看该作者
:)当然是自己分离成纤维细胞成本低啊,
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
524 
威望
524  
包包
1429  

优秀会员 金话筒

地板
发表于 2012-5-10 21:29 |只看该作者
Feeder是买的孕鼠,然后自己实验室分离,培养,照射处理的。
. r: j- e. O8 f  n- g  `mTESR对于feeder free的培养还是不错的,但是要配合适的Matrigel。
# x2 T! z4 j- h9 T一般长期维持培养,我们会选择在feeder上进行。但是有时候实验需要(类似分化,要去除MEF的影响),会先在feeder free上培养一段时间后,再进行相关的诱导分化。一般做iPS还是保守的会在MEF上进行。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
372 
威望
372  
包包
1165  

优秀会员

7
发表于 2012-5-11 12:08 |只看该作者
有些实验需要是不能用feeder的,建议做一些condition medium, 效果比mtesr好,成本中等。注意要铺matrigel。2 h5 M, n, `' {
如果要用feeder, 最好还是自己做,你买的feeder质量不一定可靠,说不定已经是4-5代的MEF,尤其是国内的供货更水。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 8 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 8  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 2

积分
126 
威望
126  
包包
178  
8
发表于 2012-5-11 19:29 |只看该作者
同意大家的说法,自己做的较保险,做一次能用好几年。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
10 
威望
10  
包包
64  
9
发表于 2012-7-7 20:14 |只看该作者
回复 sdjjfangfang 的帖子9 Y& ?% m4 |2 T+ W4 C

, G2 S9 k- r+ S$ r6 c您好,我是刚刚接触TS细胞,计划用MMC处理后的MEF细胞做饲养层,我想请教一下,TS细胞传代时怎样将其与饲养层分开,用什么消化,消化时间大概多久?谢谢
‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-6-11 03:39

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.