胚胎干细胞转染外源基因，用什么系统比较好？

wwy551

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建议使用慢病毒体系转染。目的基因可以整合进宿主细胞基因组，能长期稳定表达。我们实验室之前通过慢病毒体系向hESC转染HOXB4+EGFP，一年半之后重新FACS分选带有HOXB4的hESC时，表达强GFP的细胞比例还能达到85%

wwy551

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转染的目的基因连到慢病毒载体上，我们实验室用的慢病毒载体有pLL3.7和pCDH，这个关系不大。293T包毒，磷酸钙沉淀的方法共转染带目的基因的慢病毒载体以及另外三个包装质粒VSVG，MDLG，REV/RSV。