我做了一个重组质粒转到DH5a中，想长期保存菌种在-80，可否不用程序降温盒，直接放？ - 实验室综合讨论区干细胞之家



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查看: 156637\|回复: 18	go [请教] 我做了一个重组质粒转到DH5a中，想长期保存菌种在-80，可否不用程序降温盒，直接放？ [复制链接]

紫竹驭风

新手上路

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楼主

发表于 2012-5-16 09:00 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

如题，求赐教

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momocy

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沙发

发表于 2012-5-16 09:24 |只看该作者

我不知道标准的是怎么样，但是我都是直接放的，没什么问题。拿出的菌种用起来没问题。

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momocy

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藤椅

发表于 2012-5-16 09:27 |只看该作者

我咨询了一下，菌液和40%甘油按1:1（V:V）混匀后直接放-80℃就可以了，因为甘油具有保护作用。一些活力差的菌会死，但大部分的菌都会很好保存。不需要程序降温。

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Demon_CN

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板凳

发表于 2012-5-16 09:36 |只看该作者

对你说的质粒不太了解，* G- b: K: a& V
我是研究细胞的，
细胞冻存讲究的是缓冻速溶。缓冻所以用程序降温盒，缓慢降温) T9 J7 G& T1 `* f  c
当细胞已经降到-80的温度就没有必要用程序降温盒在-80里保存了，直接可以放
但是细胞放-80时间过长复苏活率会越来越低的，对你研究的质粒不知道会不会  P4 P' w7 s' G0 ]* t$ Z; t( M
希望能够帮到你6 N' T9 _3 R8 X7 N  m7 _

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紫竹驭风

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报纸

发表于 2012-5-16 10:14 |只看该作者

谢谢大家的热心帮助

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你点点

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地板

发表于 2012-5-16 10:47 |只看该作者

并在时甘油浓度不易太高，在15-20之间即可，如果甘油浓度过高会引起质粒的丢失。

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你点点

新手上路

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7楼

发表于 2012-5-16 10:47 |只看该作者

保存时甘油浓度不易太高，在15-20之间即可，如果甘油浓度过高会引起质粒的丢失。

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你点点

新手上路

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8楼

发表于 2012-5-16 10:47 |只看该作者

注意甘油一定要高压灭菌

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jedicheung 发短消息加为好友 jedicheung 当前离线积分 22 威望 22 包包 129 头像被屏蔽禁止访问积分 22 威望 22 包包 129	9楼发表于 2012-5-16 11:43 \|只看该作者提示: 作者被禁止或删除内容自动屏蔽

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