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外周血30ML提取EPC [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-5-22 22:13 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
离心之后液面还可以
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沙发
发表于 2012-5-22 22:15 |只看该作者
不过有一点,如何尽最大可能去除红细胞是个问题,需要用红细胞裂解液吗?请高手指点,谢谢
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藤椅
发表于 2012-5-23 01:28 |只看该作者
分离效果不是太好,因为你的血量比较少,可以先用PBS 1:1 稀释,再用15mL离心管去离心,出来中间层会比较好,而且没有那么多红血球污染,试试看0吧!!
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板凳
发表于 2012-5-23 09:23 |只看该作者
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分离效果不是太好
& t  B; d9 a) j" r2 L/ ?而且离心速度太低了,起码也要2500rpm
% D; X/ S5 e* s: m6 p( q* v; O还有用50ml离心管离心的话,其实相同的转速却达不到用15ml离心管离心的效果的,你改用15ml离心管离心吧.那样分层更明显点
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报纸
发表于 2012-5-24 02:05 |只看该作者
回复 冠忠 的帖子
4 j4 }7 M8 G2 K- Q! J
" [  y6 b+ q$ m# w; z1 |请教一下:能够取到患者30ML外周血已经不容易了,我是拿到患者外周血30ML后按1:1的比例稀释成60ML,然后将LSM:稀释后的血=3:4的比例小心地将20ML血加入盛有15MLLSM的50ML离心管中,如若换成15ML离心管怎么处理?每管加入6MLLSM,然后加入8ML稀释后的血,那岂不需要很多15ML离心管?假如取40ML外周血,稀释成80ML,需要15ML离心管一次就10个,岂不延长了操作时间,会不会对细胞不利?谢谢!
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地板
发表于 2012-5-24 02:05 |只看该作者
回复 he_liang 的帖子4 {$ u$ p" y4 o$ b2 ^

$ V9 K7 ?! `7 U, N转速加大了会不会对细胞有影响?

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发表于 2012-5-28 01:03 |只看该作者
穿越地平线 发表于 2012-5-24 02:05
6 ~7 y3 @' o$ b6 h& x回复 冠忠 的帖子  m) X9 A3 r5 J- ?  F' G

( ~4 T# x3 h/ @" ~# x请教一下:能够取到患者30ML外周血已经不容易了,我是拿到患者外周血30ML后按1:1的比例稀 ...
+ Q/ G, P6 W& x7 K
可以放心,细胞不会那么容易死掉,我有时候要做100ML血都没有问题。
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