外周血30ML提取EPC

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离心之后液面还可以

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不过有一点，如何尽最大可能去除红细胞是个问题，需要用红细胞裂解液吗？请高手指点，谢谢

冠忠

分离效果不是太好，因为你的血量比较少，可以先用PBS 1:1 稀释，再用15mL离心管去离心，出来中间层会比较好，而且没有那么多红血球污染，试试看0吧!!

he_liang

分离效果不是太好 / S6 B; A8 X1 C! x+ R
而且离心速度太低了，起码也要2500rpm
) i2 e* V& \2 F1 ]/ o还有用50ml离心管离心的话，其实相同的转速却达不到用15ml离心管离心的效果的，你改用15ml离心管离心吧.那样分层更明显点

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回复 冠忠 的帖子
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请教一下：能够取到患者30ML外周血已经不容易了，我是拿到患者外周血30ML后按1:1的比例稀释成60ML，然后将LSM:稀释后的血=3:4的比例小心地将20ML血加入盛有15MLLSM的50ML离心管中，如若换成15ML离心管怎么处理？每管加入6MLLSM，然后加入8ML稀释后的血，那岂不需要很多15ML离心管？假如取40ML外周血，稀释成80ML，需要15ML离心管一次就10个，岂不延长了操作时间，会不会对细胞不利？谢谢！

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回复 he_liang 的帖子3 A4 g8 t; S# q$ m6 C* _& P
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转速加大了会不会对细胞有影响？

冠忠

穿越地平线 发表于 2012-5-24 02:05
$ M6 G+ z2 h2 M- o  W- C, n% D+ X回复 冠忠 的帖子( g6 o: _& o. [' Q! O$ E

5 }5 G6 U- w3 C* v) V! p8 r请教一下：能够取到患者30ML外周血已经不容易了，我是拿到患者外周血30ML后按1:1的比例稀 ...

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可以放心，细胞不会那么容易死掉，我有时候要做100ML血都没有问题。