我养的脐带间充质干细胞表型检测怎么CD105表达成阴性啊？

hwlightning

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7 w4 Y; e% F) C  u: Q7 r  M" p  h1 X0 q
表达CD73 、CD90
8 v: A  B) l# r5 ^$ @4 b3 Q% L  r不表达CD34、CD459 }( G0 Z  c! H# @* J3 D# O
就是不表达CD105，是不是细胞不纯，不纯的话怎么其它表型又是可以的？& [# h* w6 L3 D2 s9 x) R
细胞来源是脐带

笨笨的图图

使用细胞刮收集细胞，对细胞损伤较大，但是不会造成CD105缺失。根据楼主的描述，除去你的胰蛋白酶的质量问题，就是你的消化时间太长了，消化过了，我们实验室出现过这种情况~

dwl1209

如果其它都表达正常，而你的细胞形态什么的基本上可以确定没问题的话，做了几次都阴性那就应该是抗体的问题了。关于胰酶，一般都是洗洗就可以了吧，好像木有人检测……个人认为使用细胞刮刀技术得很好

owenlion

CD73 、CD90、CD34、CD45有没有表达？ CD105不可能一点都没有， 方法存在问题或者细胞来源有问题

meister

有阳性对照吗， 是抗体的问题吗？

meister

有阳性对照吗， 是抗体的问题吗？

hwlightning

回复 mengnancy 的帖子) ?5 D+ g- L: `

* U$ r8 [9 ~" l+ F1 |7 m2 U做了几次CD105还是没有表达，现在都不知道是什么原因。

mengnancy

回复 hwlightning 的帖子$ Z( w' }( u4 Z7 l& C8 |

9 m( p, q# b- [. E# G9 ?再做一次流式检测，第三代细胞CD105表达应该达到99%以上。含0.25%EDTA的胰酶消化后，洗3-4次细胞。胰蛋白酶残留，没有检测过。

mengnancy

再做一次流式检测，第三代细胞CD105表达应该达到99%以上。含0.25%EDTA的胰酶消化后，洗3-4次细胞。胰蛋白酶残留，没有检测过。

hwlightning

回复 mengnancy 的帖子# [' Q+ Q& F9 m! O- L
$ M% t: N* R# A3 V7 F) I
如果用胰酶，需不需要含ETDA?