我养的脐带间充质干细胞表型检测怎么CD105表达成阴性啊？

hwlightning

我养的脐带间充质干细胞表型检测怎么CD105表达成阴性啊？
: n6 {$ r! l, A9 h还有临床上用细胞刮刀收集细胞好不好？总感觉用胰酶不好？是外源蛋白。
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menghy

你的细胞代次？还有纯度都可能影响你的结果的？
  V( P' f+ X# a, e1 j. b细胞刮刀和胰酶没有比较过，只要细胞分散好，影响应该不是很大。

mengnancy

楼主的脐带来源MSC是收集的第几代细胞做的流式？使用细胞刮收集细胞，对细胞损伤较大，细胞容易结成团，MSC胰酶消化2-3min即可消化下来，细胞受损伤小，细胞溶液中以单个细胞悬浮与流式抗体结合，细胞表面分子更容易结合。

hwlightning

回复 menghy 的帖子8 J, M' `$ ]8 e" D

1 ^7 p. r* p0 J" |. {  D细胞是第三代细胞
: G+ y: P/ X2 s. c在临床上用胰酶消化细胞，回输前要不要做胰酶残量的检测，如果含有对人体不是很危害？
) @, R* R0 }8 n9 Q其它细胞表型都正常，就是CD105为阴性

hwlightning

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/ k. O9 A' M% k5 @) H" s* B" K' w7 o! @& R3 o6 f; h
细胞是第三代% G0 E$ ]& h  d8 h* x
临床上能用胰酶吗？
* b5 P- w; s3 S( _, g8 m2 n2 d0 o我的就是其它表型都正常，就是CD105不正常，不知道是什么原因？
# M4 L+ D& |$ f  Z% o/ c* [& Q还有细胞吹散后加入人血白蛋白可以防止结成团吧！

hwlightning

回复 mengnancy 的帖子9 ^% B0 x3 m2 U% T9 j. W( m7 O/ e
2 v- ]' d  O5 Z5 A1 f; L
如果用胰酶，需不需要含ETDA?

mengnancy

再做一次流式检测，第三代细胞CD105表达应该达到99%以上。含0.25%EDTA的胰酶消化后，洗3-4次细胞。胰蛋白酶残留，没有检测过。

mengnancy

回复 hwlightning 的帖子9 h) K8 x( y6 U; d6 `% `9 V
3 a9 Q  E' z( A$ U
再做一次流式检测，第三代细胞CD105表达应该达到99%以上。含0.25%EDTA的胰酶消化后，洗3-4次细胞。胰蛋白酶残留，没有检测过。

hwlightning

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, C4 P8 L5 e0 p* a. M. n8 d做了几次CD105还是没有表达，现在都不知道是什么原因。

meister

有阳性对照吗， 是抗体的问题吗？