大家看看我扩增的MEF是怎么回事

momocy

这个MEF是从CF-1小鼠的胚胎分离的，扩增到P3代了，培养皿里有一层类似树枝样分叉的脉络，显微镜下看到的图片是这样的。大家看看是怎么回事，是因为肝脏、四肢什么没分离干净，所以分化了么？; u! e7 y$ ^, n

yongchen1314

MEF制备时除去不要的胎鼠组织，可以考虑培养基终止消化后静置5min，取上清离心种瓶，大的组织团块不要，细胞量是够的

yangpan521

杂细胞太多，建议分离时胎鼠去头、去尾、去四肢和去内脏。只用北部的一点点就足够了，有条件的话在300目的筛网过滤一下，效果非常好。

573639471

我遇到过，有两种可能：
2 ~1 @9 G1 b7 P! O0 O, v" r0 I第一，如果是从原代开始一直有，那就很明显是未消化的组织块贴壁后形成的克隆
3 g. Q& W' v) J% h1 Z第二，如果是P3传代后才出现的，那么是传代的时候消化过度，细胞黏连了，又没吹散，即细胞团形成的克隆

huangcong1988

看第二张图的时候我觉得是老化了，但是才P3，不至于啊，放大倍数说明一下可能好判断一些

momocy

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# S! g' X% y8 j. W! Y7 p4 v
9 J# j- h; e8 S" L  j不像啊，我这个细胞密度不大，而且我以前细胞长的密的时候也没有卷边啊，我一直很怀疑是分化组织没有剔除干净。

ligangtiancai

看上去像是细胞密度过大导致的卷边。。。我遇到过

iseeyou1210

是MEF, 但是消化不好，细胞成团，长成colonies。
; i# ?* O8 X2 s* o" W那些有分支的细胞可能是neuron细胞，但是太多了也不正常，传代以后会loss。
% G+ x) Z7 I' j+ `7 R1 n, eMEF一般都是分化的细胞，不存在什么分化的问题。

ontheway_hit

感觉细胞的界限不是很清楚，而且细胞长得像蝌蚪，不是MEF吧？

momocy

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7 [) w% ]6 F4 N- G* J1 @
/ u& A! x2 N1 }- K* B/ V是贴壁的