求助原代大鼠骨髓间充质干细胞生长不均匀的问题

天枰2012

回复 orchard 的帖子8 k: j* F! [+ j

5 r: m, w' L& }" S' T5 y, ^有过，我们的原代也很少，所以经常这样做，从生长情况来看，没有多大的影响

orchard

回复 haibara007007 的帖子
5 X6 C  c1 a/ s* H& j. }; o- _1 x. Q
嗯 我已经打算打算重新接种了 多谢指教

orchard

回复 Tim 的帖子
. V" o; D! r! z4 w! S/ H& s" H' M: k: [& F) S; B( i
打散打散 记住啦

orchard

回复 shizhu198511 的帖子6 S2 P. Q" q/ K( r- S: o

# ]9 q% v) o1 H8 z$ d* D嗯 我再重新打散一遍 多谢啦

haibara007007

我估计还是你传代时细胞接种不均匀，造成细胞浓度不一，所以有些地方密集，有些稀松，最好消化后重新接种，记得接种后摇晃不要过于剧烈，造成气泡，气泡部分就不会有细胞

orchard

回复 ontheway_hit 的帖子
8 }& w, q. V  r2 Q/ c) D
* W# ~1 D: A, Q( T, n# D) H; i多谢提醒，我们的培养箱应该还好，因为没听说别人的细胞有类似的情况，可能还是我的问题吧

orchard

回复 如来的观音 的帖子
4 A  B$ c! z- k6 }: @: o5 M+ {, s7 a" f2 r) U6 }/ ?
垂直向也要晃动啊？

Tim

回复 orchard 的帖子
2 h; q% Y0 F1 C( z$ G8 G  x) x$ o" O2 ^  q0 D
我前几天也遇到了消化完加培养液直接养！记得打散啊!

shizhu198511

orchard 发表于 2012-6-1 10:03
( S% C$ {# i7 B2 C8 ?5 L7 ~+ u我之前已经传过两次了，请问大概到第几代的时候才会长均匀呢？是不是一定要生长均匀的细胞才能用于正式的 ...

$ l4 ?7 Z( ^! |! M& \
原来你这算P3代了吧，可能你消化过程有问题吧，要先用PBS洗2次后再加胰酶消化，消化后要吹打均匀，最好是单细胞状态，然后装入培养瓶时最好前后，左右均要摇晃一下，一般不会不均匀呀

ontheway_hit

原代长得很好，而第二代长得不好，我觉得肯定是你操作的原因，或者是上面说的培养瓶不平，或者是种细胞时没铺平。