骨髓间充质干细胞，原代和3代后的细胞图片，大家帮分析下什么情况

hhxxattxs123

hhxxattxs123

3代后的细胞杂乱无章，无规则，那算是骨髓间充质干细胞吗？不应该是梭形的吗？还有就是原代的细胞就开始变宽平，感觉已开始老化，是何原因呢？高手指点下呗，谢谢

illidancui

貌似你养的这个是大鼠的吧，如果是的话感觉形态还好。这个本来就很难养成人的那种形态。一般是三代左右开始老化，原代开始的话貌似有点快。如果可以的话，可能加生长因子会有好的效果。

daytoday

3代后貌似有污染，原代细胞状态就不佳
; q8 C0 ~& y! F2 n  X, d真正的大鼠MSC生长速度极快，梭形或者三角形，边缘光滑，细胞极少分叉
! u, C# p8 {1 [3 X0 t常见核分裂像，invitrogen官网上有典型图片
# P% w7 ~/ C" ], Bhttp://products.invitrogen.com/ivgn/product/S1601100?ICID=search-s1601100

hhxxattxs123

嗯啊，他们建议用的是Alpha MEM 培养液，用低糖的DMEM和他这个差别大吗？

hhxxattxs123

污染？但是这个不是细菌污染啊，没有浑浊啊，那是什么东西呢，是培养瓶不干净或者是培养液有蛋白沉淀？
" g/ R) p6 Q% Z1 x  c

hhxxattxs123

回复 daytoday 的帖子' ^: M/ |7 Q6 {1 G( ~8 L

6 _7 E- q4 h4 j. W$ J我看不像是细菌污染，我看过细菌污染的细胞，液体变的浑浊，是不是支原体污染呢，支原体污染的表现是什么样子啊，还有怎么预防和处理呢，刚配好的培养液需要检菌的，我都是等3天，没有浑浊就开始用了，是不是时间有点短呢，别人有说是等5天的

hhxxattxs123

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$ ~% r3 J- x4 e5 U& ^; s5 V/ G) ?3 A) P6 g7 L/ X0 k$ W; p
如果这种细胞要做转染的话，效果不好呢，看到文献上有说是等到3代的时候转染最好，但是3代就开始老化了呀，所以现在很纠结

daytoday

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5 C# W4 H7 i0 I) Y7 ~用低糖可以的。alfa-MEM是用来分化的时候作为基础培养基
+ Q/ L! v5 Q: h9 p6 |污染可能是血清里面带来的或者是取原代的时候带来的，不是普通的细菌污染，是我们称之为小黑点的东东
2 P" t# g' c- X# G( I8 }
! C  e: \) L  k5 `建议这种细胞状态不要转染了，浪费时间和金钱$ g7 S  h7 e* e5 `6 h. R. k- c. h

zlqamy

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4 S5 O) ~7 k! Q7 g8 o5 L! D, t4 O% Q/ ~, L( M
请问小黑点点是什么东东？这种东西污染后是什么症状？如何去除？最近养的细胞总觉得不干净。