小鼠胚胎干细胞在滋养层上的形态特点?附图，请鉴别是否为干细胞

lsjj619

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2 k" ~0 r  v( [4 W" y! |如题: Y9 z, U% k; Z* x' v0 ]4 S
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6 D- z6 X7 g! ?2 n2 k: M- j2 T2 L  ]" ?" }4 `+ Q9 D6 m) b

# a$ n7 `$ ?$ {" ?8 C
2 ?8 U8 @1 ^3 s8 s& |2 b本来是订购了Life公司的Knockout血清替代培养基的，但是被海关卡住了，只能自己配制了。下面是我的配方，有没有要改进的呢？怎样才能把干细胞培养好呢？( {6 R% h6 g( {

0 v: ~3 U* r1 h8 V/ o8 X6 M  Z                        储存浓度            工作浓度                   体积 , p% l. i9 ]* g- t, [$ k, m
FBS                      100%               15%                       7.5 ml
* O& v9 S  m8 B0 {NEAA                     100X               1X                        0.5ml
$ B- G7 n8 c9 f& O# K; \Pyr                       100X               1X                        0.5ml
4 p8 f3 E7 T/ Y: p6 G6 U双抗P+S                  10,000unit          100unit                    0.5ml4 a0 @2 N' \. ?% L9 s- ~
2-mercaptoechanol          55mM             0.1mM                     90ul
/ |6 E; b- ~* K- [' ]4 qLIF                       106 unit/ml          1000unit/ml                 50ul
( n4 q, c4 ^2 Z  ?! _DMEM（High-Glu）补足至50ml。
2 t3 a8 x3 ?( j7 Q

lsjj619

因为不支持图片的格式，所以只能附件上传了，希望高手们能多停留2分钟帮忙看一下

yuhaoze

2 A2 F% I7 U' n1 f% U4 V
) k- \  B* `' n% s8 n2 M
照的不清楚啊  养在哪里，有什么照的相？5 ^# A8 ]4 t* M2 s- x! E# Z& |
是不是饲养层细胞图，这个你自己有数，饲养层有没有长满消化成团往下掉？要是没有的话，那些土豆就不是饲养层细胞

lsjj619

回复 yuhaoze 的帖子& K+ ^9 {. U5 V* U/ z: w
! K, Y" j& A, N$ B6 z+ Q
养在6-well plate里面啊，一消化，细胞全部都掉下来了，用奥林巴斯的倒置荧光显微镜

lsjj619

回复 yuhaoze 的帖子
% y3 T& |. n6 z1 o( a7 I- q  K& c6 O
! v) t* L3 H9 w' U" M饲养层细胞是挺密的，几乎全铺满板了

yuhaoze

六孔板绝对能拍清楚，选中间的光圈，拿出你最大的功力拍张图啊！* f2 U- b, [* j2 Z" S" V) |
feeder太密了，我昨天铺了一个。2x10E4/cm2 觉得还可以，计个数再接，这样实验有平行性，找愿意比较方便，别让它张的太满了~

zlqamy

上面的两张图放大倍数太小了，看不清啊。下面的应该不是干细胞

yuanyan2010

第一张和第二长上面很多干细胞，第二张图标指示的是干细胞，应该不是feeder，下面三张应该是没消化好的feeder团块吧，不是干细胞。

zpzp0312

第一第二张图片的可用

lsjj619

回复 yuanyan2010 的帖子7 |' y( b1 z' N4 h5 \
6 E0 Q0 s( w& L1 p* N, u
那前两张的干细胞还是正常未分化的吗？别人养的好的，干细胞团是紧密的球状的，我的这个真的是吗？