小鼠胚胎干细胞在滋养层上的形态特点?附图，请鉴别是否为干细胞

lsjj619

9 s7 g( D8 B! n; z! k

8 [7 V. }- L+ S9 U4 N  q2 `如题3 J5 @! A/ ~4 ]+ R2 ?/ s

: o6 _# N- u9 ?6 C9 v- F* |" K8 {
$ S$ d% B# \3 F

3 D) s* c  x5 o$ Z2 A2 K# h4 a
5 A" U- D0 x/ X/ r& I7 p本来是订购了Life公司的Knockout血清替代培养基的，但是被海关卡住了，只能自己配制了。下面是我的配方，有没有要改进的呢？怎样才能把干细胞培养好呢？5 j! }& |( o: q9 j7 l3 i
) L+ S# m7 v- E
                        储存浓度            工作浓度                   体积
3 g# w* r$ Y  |. wFBS                      100%               15%                       7.5 ml
/ M9 A6 v* ~- iNEAA                     100X               1X                        0.5ml; S3 J( O3 F3 T. I" ]$ o8 \
Pyr                       100X               1X                        0.5ml
0 t6 Y. s. O9 a# P6 A双抗P+S                  10,000unit          100unit                    0.5ml% Q) E/ t2 \) r" U8 Y: Q  x
2-mercaptoechanol          55mM             0.1mM                     90ul
9 i/ R' }( j  A0 r1 gLIF                       106 unit/ml          1000unit/ml                 50ul5 C4 W; V+ f3 z6 ~
DMEM（High-Glu）补足至50ml。
3 q) ]3 v/ J/ p* ^

lsjj619

因为不支持图片的格式，所以只能附件上传了，希望高手们能多停留2分钟帮忙看一下

yuhaoze

4 o% }& F: R0 c9 `" [+ g4 a4 V

, e" b$ m( ^; Y' I+ l4 [照的不清楚啊  养在哪里，有什么照的相？
: Q* B  N, S! y" R是不是饲养层细胞图，这个你自己有数，饲养层有没有长满消化成团往下掉？要是没有的话，那些土豆就不是饲养层细胞

lsjj619

回复 yuhaoze 的帖子" r1 j8 ]" G) O$ g7 B+ Y# o* T

9 ?' q- @9 g4 W' a" G养在6-well plate里面啊，一消化，细胞全部都掉下来了，用奥林巴斯的倒置荧光显微镜

lsjj619

回复 yuhaoze 的帖子9 H7 T# b3 u: x, C

$ N& c; N/ f% x$ b! t饲养层细胞是挺密的，几乎全铺满板了

yuhaoze

六孔板绝对能拍清楚，选中间的光圈，拿出你最大的功力拍张图啊！) ^4 f* J: [8 [' x
feeder太密了，我昨天铺了一个。2x10E4/cm2 觉得还可以，计个数再接，这样实验有平行性，找愿意比较方便，别让它张的太满了~

zlqamy

上面的两张图放大倍数太小了，看不清啊。下面的应该不是干细胞

yuanyan2010

第一张和第二长上面很多干细胞，第二张图标指示的是干细胞，应该不是feeder，下面三张应该是没消化好的feeder团块吧，不是干细胞。

zpzp0312

第一第二张图片的可用

lsjj619

回复 yuanyan2010 的帖子
& o7 c8 }; j7 z- T. H9 s, v( d2 q( x  D
9 e! e$ q) z7 y那前两张的干细胞还是正常未分化的吗？别人养的好的，干细胞团是紧密的球状的，我的这个真的是吗？