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请教核型分析的步骤 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-6-12 01:04 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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如题,辛苦大家了 多谢啦

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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2012-6-12 09:35 |只看该作者
实验过程:
" ]% Q9 l. z4 K1 U待细胞融合达80%,接秋水仙素到培养瓶中终浓度为0.2ug/ml,孵育4h;
& G/ V$ |$ e" [0 b- ]# l收集细胞:0.25%胰酶消化,137g,5ml离心管,1500rpm离心5min;
8 Y1 S# @, ?8 x8 N. g/ w低渗透:细胞沉淀用0.075MKCl(已预热)重悬,再补足至5ml,用枪头轻轻吹打,37度水浴孵育20min;
6 ]) u5 B. v  l/ W$ o预固定:加200ul新配固定液,137g,1500rpm离心5min;
* `* V9 _- r9 q固定:细胞沉淀用新配的固定液重悬,过夜固定;
7 n2 Z, M$ H7 G4 q7 \; f, @重复固定:137g,1500rpm离心5min,重复固定两次;: J: t2 \! V0 A; E5 v
细胞沉淀用200ul新配置固定液重悬;$ D/ q5 M  {5 ^- k  S! h
近距离滴片(冰片);
7 z$ t5 i9 [+ u. p6 d90度水温,蒸汽熏蒸30s;# ?$ ?! a5 V( `2 I$ a* a
火焰上固定5s,吉姆萨染液染色;
3 `% g/ y$ _8 Y6 Q, H镜检
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小小研究员

沙发
发表于 2012-6-12 02:43 |只看该作者
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