 
- 积分
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- 威望
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- 包包
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实验过程:# l% R( ?3 Y$ L2 R3 @' }
待细胞融合达80%,接秋水仙素到培养瓶中终浓度为0.2ug/ml,孵育4h;
2 P! o2 G: w7 j7 @9 w9 ~* g/ \收集细胞:0.25%胰酶消化,137g,5ml离心管,1500rpm离心5min;
/ p5 J* Q: U! _1 c7 w低渗透:细胞沉淀用0.075MKCl(已预热)重悬,再补足至5ml,用枪头轻轻吹打,37度水浴孵育20min;6 N3 ?; p6 t$ {% H: _
预固定:加200ul新配固定液,137g,1500rpm离心5min;9 f* o1 R7 z9 b8 V
固定:细胞沉淀用新配的固定液重悬,过夜固定;* H4 D; _4 I$ s. v. x
重复固定:137g,1500rpm离心5min,重复固定两次;
% P! Q" Q7 s6 j( b1 }9 F K细胞沉淀用200ul新配置固定液重悬;7 E* S i9 x7 H3 e
近距离滴片(冰片);
1 l* i) X& {: r. f7 O) {2 p90度水温,蒸汽熏蒸30s;& L$ l( d: U. \$ W2 O, Q% \
火焰上固定5s,吉姆萨染液染色;: {/ l2 ?1 L9 i: r8 u7 [
镜检 |
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总评分: 威望 + 5
包包 + 10
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