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go

请教核型分析的步骤 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-6-12 01:04 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
如题,辛苦大家了 多谢啦

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小小研究员

沙发
发表于 2012-6-12 02:43 |只看该作者

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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2012-6-12 09:35 |只看该作者
实验过程:# l% R( ?3 Y$ L2 R3 @' }
待细胞融合达80%,接秋水仙素到培养瓶中终浓度为0.2ug/ml,孵育4h;
2 P! o2 G: w7 j7 @9 w9 ~* g/ \收集细胞:0.25%胰酶消化,137g,5ml离心管,1500rpm离心5min;
/ p5 J* Q: U! _1 c7 w低渗透:细胞沉淀用0.075MKCl(已预热)重悬,再补足至5ml,用枪头轻轻吹打,37度水浴孵育20min;6 N3 ?; p6 t$ {% H: _
预固定:加200ul新配固定液,137g,1500rpm离心5min;9 f* o1 R7 z9 b8 V
固定:细胞沉淀用新配的固定液重悬,过夜固定;* H4 D; _4 I$ s. v. x
重复固定:137g,1500rpm离心5min,重复固定两次;
% P! Q" Q7 s6 j( b1 }9 F  K细胞沉淀用200ul新配置固定液重悬;7 E* S  i9 x7 H3 e
近距离滴片(冰片);
1 l* i) X& {: r. f7 O) {2 p90度水温,蒸汽熏蒸30s;& L$ l( d: U. \$ W2 O, Q% \
火焰上固定5s,吉姆萨染液染色;: {/ l2 ?1 L9 i: r8 u7 [
镜检
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