请教核型分析的步骤

Helena110

如题，辛苦大家了 多谢啦

liluli0715

实验过程：/ a( O: v$ U' M
待细胞融合达80%，接秋水仙素到培养瓶中终浓度为0.2ug/ml，孵育4h；! \3 ~4 T7 {) I8 K
收集细胞：0.25%胰酶消化，137g，5ml离心管，1500rpm离心5min；
. {0 F! h- u3 W+ X7 H, w低渗透：细胞沉淀用0.075MKCl（已预热）重悬，再补足至5ml，用枪头轻轻吹打，37度水浴孵育20min；
! C- v" ?% ~: ]4 i/ o预固定：加200ul新配固定液，137g，1500rpm离心5min；
3 B7 U  h  V  u8 Y9 \$ g4 i固定：细胞沉淀用新配的固定液重悬，过夜固定；, m0 J% y9 A' w7 _) j: N) `
重复固定：137g，1500rpm离心5min，重复固定两次；' l2 l* s) I& n- e' t
细胞沉淀用200ul新配置固定液重悬；
( H$ U2 i0 J8 {近距离滴片（冰片）；
( U" V! J/ i" n( e2 s# |90度水温，蒸汽熏蒸30s；
* ]3 y# J9 y! U" D5 M; u( }火焰上固定5s，吉姆萨染液染色；
2 F: e- D3 v5 e9 y; x8 x镜检

细胞海洋

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