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- 积分
- 372
- 威望
- 372
- 包包
- 605
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实验过程:
; K% E/ O* F5 V) ~, Z W待细胞融合达80%,接秋水仙素到培养瓶中终浓度为0.2ug/ml,孵育4h;
) D$ Z# g+ t4 V; F7 }收集细胞:0.25%胰酶消化,137g,5ml离心管,1500rpm离心5min;* B2 y1 o4 W; t- @
低渗透:细胞沉淀用0.075MKCl(已预热)重悬,再补足至5ml,用枪头轻轻吹打,37度水浴孵育20min;
! {% r d* t7 T; H4 Q预固定:加200ul新配固定液,137g,1500rpm离心5min;
% }: F' L/ r. ~) ~4 w: ]: }固定:细胞沉淀用新配的固定液重悬,过夜固定;9 {) c* A" b% B$ w1 G- x
重复固定:137g,1500rpm离心5min,重复固定两次;- _: v% d% V+ {. ?+ U1 J2 h8 s/ a/ e
细胞沉淀用200ul新配置固定液重悬;
5 M; @" r4 _9 p* N" E近距离滴片(冰片);
- ?8 N0 B* G' E; h; X5 \. `90度水温,蒸汽熏蒸30s;
3 @& `2 ~9 g" p/ C火焰上固定5s,吉姆萨染液染色;
6 ^" {2 {, r. y4 ~& V# h0 K镜检 |
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总评分: 威望 + 5
包包 + 10
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