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关于CIK细胞冻存   [复制链接]

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发表于 2012-6-12 17:25 |只看该作者 |正序浏览 |打印
请教各位前辈,CIk细胞冻存时DMSO的浓度以及一个冻存管冻存细胞的量是多少?各位做CIK临床应用是否会将细胞冻存起来,等临床需要时再解冻使用?
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发表于 2016-3-17 15:14 |只看该作者
冻存密度要控制在10的六次方左右,不能到7次方,那样会死很多,CIK细胞正常临床上是不冻存的,因为数量太大,冻存不能用冻存管智能用干细胞领域的冻存袋,但是即使是这样恐怕也需要最大规格的冻存袋,冻存后细胞活率会受影响越大数量的冻存损失数量越多,一般在15%-30%左右,而且细胞活力或分泌功能还需要进一步检测,一般冻存后需要复苏培养在为病人回输副作用才会小一点,东存液配比可以按照楼上回复的比例更可以直接买那种品牌成包装的东存液更好一点。
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发表于 2016-3-16 16:55 |只看该作者
冻存不划算,成本太高。
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发表于 2016-3-16 16:35 |只看该作者
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建议在单个核细胞分离后马上冻存,这样算好回输时间复苏、诱导、扩增,回输前的细胞活性可以有效保证。冻存的CIK细胞复苏后直接回输,恐怕活力和临床安全性都会下降。
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发表于 2016-3-16 12:08 |只看该作者
对于传统方案,10%DMSO,FBS和培养基共90%;一般FBS浓度越高效果越好,但是动物源性血浆存在类如牛源支原体污染的风险。
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发表于 2016-3-16 11:06 |只看该作者
建议不要冻存,如果冻的话就培养基:血浆:DMSO=5:4:1,你可以试试
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发表于 2016-2-29 14:09 |只看该作者
回复 李黎 的帖子
4 o# z# O$ `9 @9 w8 ?  |- Z
- @1 ^) E( a- D: j+ b冻存后复苏状态不怎么样,而且细胞量太大,冻存成本略高
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金话筒 优秀会员

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发表于 2016-2-29 09:34 |只看该作者
我们也尝试过很多方法冻存过,包括DMSO:培养基=1:9,DMSO:血清:培养基=1:1:8,添加PEG2000,还要购买现成的冻存液,发现效果都不太满意,CIK复苏时死亡率较高,得率较低,而且状态较差,不太适合临床会输。
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发表于 2015-10-28 13:29 |只看该作者
1640:胎牛血清:DMSO按7:2:1来配冻存液
' }. |1 B6 Y8 ]+ a密度会按2*10^7每毫升来
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发表于 2015-10-28 10:39 |只看该作者
是的,冻存太不划算乐,还不如在才一次血液呢,cik比较脆,复苏后状态一般不好
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