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[请教] 养的293T细胞中出现了克隆球,不会是ES细胞污染吧?求高手指教 [复制链接]

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发表于 2012-6-14 08:53 |只看该作者 |正序浏览 |打印
养的293T细胞中出现了类似ES细胞的克隆球,不知道是不是ES细胞污染了,可是ES细胞能在普通的D/F12血清培养基中维持不分化状态吗?养了2天的293T,差不多都长满了,但是有几个部位却一个细胞都没有,看着像噬菌斑,到底是怎么回事啊?求高手指教啊!
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发表于 2012-7-16 23:11 |只看该作者
最近在养293T,你这应该不属于噬菌斑,噬菌斑的外部轮廓不应该这么不规则的……
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发表于 2012-6-26 13:11 |只看该作者
我在做G418筛选的COS7细胞的时候遇到过这种情况,因为COS7也是那种长得很快的细胞。在筛选了一定时间,阳性细胞的地方就越长越密,最后就在有的孔里面出现这中东西,而且还有这个飘起来的,非常恶心,也不是什么细胞状态不好,就是长太多了。所以你只要在消化之后,吹打得匀一点,再接种到新的培养瓶里面就好
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发表于 2012-6-16 08:49 |只看该作者
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回复 zlqamy 的帖子# v7 ~# ]5 X5 ~% S# |
! F8 o& w6 g2 f
细胞形态不太对吧?感觉形态怪怪的

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发表于 2012-6-15 08:51 |只看该作者
应该是细胞密度太大的缘故,或者是在传代时,消化不够,本来293T贴壁不牢,成片下来再种就会不均匀,密得地方就会这样。所以不要等到太密再传代,这样细胞状态也会不好哦。
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发表于 2012-6-15 08:41 |只看该作者
回复 myboluo 的帖子
9 W* o! s) L6 \4 m( a! `' Q+ [6 a& }- `) |/ u& D7 O
非常感谢!

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发表于 2012-6-15 02:51 |只看该作者
回复 myboluo 的帖子/ x9 Q" t8 A7 R+ J

! h! ?' B; R. F1 L/ T% ?5 u严重同意楼上

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发表于 2012-6-14 12:42 |只看该作者
细胞状态不好罢了,应该不是污染。之前养同样出现过这种情况,而我们实验室从来不做ES细胞。# n5 }5 I7 \' V# M. S" Q9 D
成球的应该是成团掉下来的293t细胞,你说的“噬菌斑”应该也是这样形成的,之前遇见这种情况我猜测是局部细胞密度过大。楼主回忆下你消化时是不是细胞没吹匀,或细胞没吹散,然后细胞是一个聚落一个聚落长起来的?这样就容易使局部生长过密。293t生长还是挺快的,而且很容易聚团长,消化时需要多吹打,勤传代,密度太高肯定影响细胞生长。
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发表于 2012-6-14 09:47 |只看该作者
肯定不是污染,这种情况我也出现过。楼上说你的细胞状态不太好,传代之后就会好的,但是球球不会消失,而且越聚越多。离心可以除去。
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发表于 2012-6-14 09:38 |只看该作者
应该不是吧,另外阁下293T状态不怎么好啊,好多小窟窿
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