请教：关于DC成熟的问题？

gengtongyu521

DC细胞单独培养时，常理来说，第10天已经成熟了，成熟的DC绝大部分应该呈悬浮的树突状，可是我在培养肝癌病人的细胞时，第10天还是贴壁很牢固（该加的因子都已经加了），圆形或梭形，我怀疑这些会不会癌细胞啊？请大家帮我分析一下。你们培养的DC都多少天成熟？做流式检测了吗？用什么抗体测的？谢谢

gengtongyu521

怎么木有人回答我的问题啊？

大少爷

DC细胞培养时，七天左右成熟，成熟的DC并不是全部是悬浮的，还是有很多贴壁的细胞，要收集的话还是要用移液管吹打才行。

wagumaxida

gengtongyu521 发表于 2012-6-25 12:44
* ^. _! r# P! Y' P2 FDC细胞单独培养时，常理来说，第10天已经成熟了，成熟的DC绝大部分应该呈悬浮的树突状，可是我在培养肝癌病 ...

1 d0 V" V* s  X5 h, K- \
有可能是刺激成熟不够，在加TNF-α的时候可以再加入一些OK432或者LPS，当然贴壁也不一定不是树突细胞，如果吹起来仍呈圆形或梭形，那就有问题了，一般第七天催熟，第八天就成熟了，流式检测贴壁细胞和未贴壁的相差不大，因此有人说贴壁的也可能是树突细胞，一般采用的流式抗体是抗CD80 CD83 CD86和CD1α，如果条件允许还可以检测HLA-DR，CD40等等

gengtongyu521

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+ c) c( [) Q! h" t. R! a3 L$ f7 [6 Z
8 N6 o8 U  c5 n" K7 l非常感谢哪。

sciencesky1

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+ d" w& ]  h% h) l4 V  H$ ]$ S) t/ ^7 ?  |/ ]
您好，有一些DC培养的问题想请教您，我做的脐血DC，现在诱导到第8天了，悬浮的细胞不是很密，有好多贴壁的长梭形细胞产生，感觉有点像间充质干细胞，您说贴壁的DC是呈圆形还是长梭形？

apai2003

首先成熟DC是半悬浮状态，有部分贴壁也属于正常现象，不排除部分是巨噬细胞（有部分单核细胞会向巨噬细胞方向转化），但应该不会是癌细胞；DC培养周期基本是7天左右，收集后可通过流式检测其纯度和成熟度，抗体包括CD11c/CD80/CD83/CD86和HLA-DR等，其中CD83用来判定DC成熟度。