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[请教] 请教跑胶在点样孔有时候会有很亮的条带跑不下来, [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-7-3 18:18 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问是什么?为什么造成这样子?
4 W0 s' U  J! \0 Y# b另外再请教一下,怎么样判断RNA电泳中DNA是否有污染?
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沙发
发表于 2012-7-3 20:30 |只看该作者
很亮的条带一般是蛋白质杂质.RNA中是否有DNA污染可以通过测定OD260/280吧,在纯水中比例1.9-2.0,低于1.9则说明DNA污染
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藤椅
发表于 2012-7-4 02:45 |只看该作者
如果你的胶干得太厉害,或者电泳缓冲液太少,也有可能出现这种情况。
+ `% Q* A& }* v& g第二个问题,你是怀疑RNA样本被gDNA污染么?你可以用RNA样本跑不跨内含子的PCR,有条带就证明有污染。或者干脆进行DNA酶处理,二次抽提。
, u2 U) X! Y+ j. i或者看看有没有达人还有好办法
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优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2012-7-7 08:07 |只看该作者
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RNA里面是否有DNA污染可以从两个方面判断:1,nanodrop2000测浓度的时候OD比值(260比280),一般情况下是2.0左右,稍微小一点或者稍微大一点无碍,但是小的太多就可能是DNA污染2,看电泳图片,电泳图片中,如果有一条带(或者弥散的带)在胶孔附近的话,就可能是基因组污染
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